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本發(fā)明公開(kāi)了一種檢測(cè)CP4?EPSPS蛋白的電化學(xué)免疫傳感器及其制備方法和應(yīng)用，基底電極表面依次經(jīng)AuNPs?CMK?3分散液修飾，EDC和NHS的混合溶液活化，CP4?EPSPS抗體和硫堇的混合溶液共價(jià)結(jié)合處理。所述基底電極為玻碳電極，所述CP4?EPSPS抗體為納米抗體。本發(fā)明的電化學(xué)免疫傳感器具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、儀器輕便易攜帶等明顯優(yōu)勢(shì)，可以在生物大分子的檢測(cè)方面發(fā)揮重要作用，具有廣泛的應(yīng)用前景。

本發(fā)明涉及一種綠盲蝽唾液酶中蛋白酶與纖維素酶的體外提取測(cè)定方法，利用Paraflim膜，采取膜夾營(yíng)養(yǎng)法提取綠盲蝽唾液酶，并測(cè)定綠盲蝽中蛋白酶與纖維素酶的活性，Paraflim膜法提取綠盲蝽唾液酶利用Paraflim膜、膠卷盒、紗布、橡皮筋、位于兩層Paraflim膜間的液體營(yíng)養(yǎng)介質(zhì)，利用酶與底物反應(yīng)的原理，測(cè)定綠盲蝽唾液中蛋白酶、纖維素酶的活性。本方法材料易得，操作簡(jiǎn)單方便，制作成本低，占空間小，可實(shí)現(xiàn)綠盲蝽唾液酶的大量、批量提取，并且綠盲蝽可繼續(xù)回收利用。

本發(fā)明屬于農(nóng)產(chǎn)品加工及副產(chǎn)品綜合利用技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明對(duì)大豆乳清蛋白 廢水綜合利用，原料無(wú)需干燥，設(shè)備要求低，操作簡(jiǎn)單，無(wú)環(huán)境污染。且 Kunitz型胰蛋白酶抑制劑回收率高，純度高，蛋白活性高。 低濃度的胰蛋白酶抑制劑是廣譜抗致癌因子，能預(yù)防結(jié)腸癌、肝癌、口腔癌、肺癌等多種癌癥的發(fā)生，還有降低膽固醇水平的作用；能增強(qiáng)胰臟生長(zhǎng)和增加胰消化酶的活性，且對(duì)動(dòng)物內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子具有活化作用；能控制腎小球腎炎或腎盂腎炎的一些炎癥發(fā)展過(guò)程。此外，微量胰蛋白酶抑制劑對(duì)于糖尿病治療，調(diào)節(jié)胰島素失調(diào)有一定效果。醫(yī)藥上提取胰蛋白酶抑制劑(抑肽酶) 治療急性胰腺炎

基于該實(shí)驗(yàn)室所發(fā)展的位點(diǎn)特異蛋白質(zhì) - 聚氨基酸偶聯(lián)技術(shù) (J. Am. Chem. Soc. 2016, 138, 10995?11000) ，以干擾素 -α2b （一種抗病毒和抗腫瘤藥物）為模型藥物蛋白合成了頭 - 尾相接的干擾素 - 聚氨基酸大環(huán)偶聯(lián)物，并將其與野生型干擾素， 2 個(gè)線型干擾素 - 聚氨基酸偶聯(lián)物，以及 1 個(gè)線型干擾素 -PEG 偶聯(lián)物平行比較。研究結(jié)果表明，無(wú)論在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)還是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)層面，干擾素 - 聚氨基酸大環(huán)偶聯(lián)物的藥學(xué)性質(zhì)均明顯優(yōu)于其他對(duì)照組。最為特殊的是，大環(huán)偶聯(lián)物不僅僅具有傳統(tǒng)蛋白質(zhì) - 高分子偶聯(lián)物的典型優(yōu)勢(shì)如長(zhǎng)循環(huán)時(shí)間和高腫瘤滯留，還有環(huán)狀多肽藥物特有的高腫瘤滲透性。由于這一系列的優(yōu)異性質(zhì)，干擾素 - 聚氨基酸大環(huán)偶聯(lián)物最終在多個(gè)動(dòng)物模型中都表現(xiàn)出優(yōu)異的抗腫瘤活性，其抑制腫瘤生長(zhǎng)效果明顯優(yōu)于實(shí)驗(yàn)對(duì)照組（包括野生型干擾素， PEG 偶聯(lián)物和線性聚氨基酸偶聯(lián)物）。

【項(xiàng)目來(lái)源】科技部公益性行業(yè)專(zhuān)項(xiàng)資助項(xiàng)目。 【項(xiàng)目簡(jiǎn)介】針對(duì)主要產(chǎn)地加工與炮制生產(chǎn)環(huán)節(jié)交叉重復(fù)，加工操作繁瑣，易導(dǎo)致中藥飲片有效成分流失等問(wèn)題，選擇30個(gè)品種為主要研究對(duì)象，按適宜產(chǎn)地加工類(lèi)別，通過(guò)技術(shù)研究與集成創(chuàng)新，將中藥飲片產(chǎn)地加工與炮制生產(chǎn)相關(guān)工序進(jìn)行有機(jī)整合，明確各環(huán)節(jié)技術(shù)參數(shù)及應(yīng)用范圍，建立形成具有優(yōu)化生產(chǎn)環(huán)節(jié)、便于儲(chǔ)存運(yùn)輸、降低成本等優(yōu)勢(shì)的產(chǎn)地加工與炮制生產(chǎn)一體化的關(guān)鍵技術(shù)、規(guī)范和加工設(shè)備。 【技術(shù)指標(biāo)】 1. 制定各類(lèi)《中藥飲片產(chǎn)地加工與炮制生產(chǎn)一體化技術(shù)規(guī)范》4項(xiàng)。 2. 中藥飲片產(chǎn)地加工與炮制生產(chǎn)一體化設(shè)備4套。 3. 30種中藥飲片產(chǎn)地加工與炮制生產(chǎn)一體化生產(chǎn)SOP。 4. 中藥飲片產(chǎn)地加工與炮制生產(chǎn)一體化過(guò)程控制系統(tǒng)1套。 5. 申請(qǐng)專(zhuān)利和軟件著作權(quán)5項(xiàng)、發(fā)表論文56篇；培養(yǎng)專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員及研究生60名。 6. 中藥飲片產(chǎn)地加工與炮制生產(chǎn)一體化技術(shù)規(guī)范在中藥材加工產(chǎn)地及基地推廣，提供可行性應(yīng)用報(bào)告。 【推廣應(yīng)用前景】 本項(xiàng)目可以解決中藥材產(chǎn)地加工及飲片生產(chǎn)一體化方面的關(guān)鍵技術(shù)問(wèn)題，提高中藥材產(chǎn)地加工過(guò)程的科技水平，促進(jìn)中藥飲片產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。預(yù)計(jì)本項(xiàng)目完成后，將形成5-10個(gè)國(guó)內(nèi)一流水平的中藥材產(chǎn)地加工及飲片生產(chǎn)示范基地，全部生產(chǎn)線均由產(chǎn)地加工及飲片生產(chǎn)一體化設(shè)備組成，并實(shí)現(xiàn)全過(guò)程信息化控制，在整個(gè)中藥飲片行業(yè)具有示范效應(yīng)，引領(lǐng)中藥飲片產(chǎn)業(yè)的科技進(jìn)步和產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)型升級(jí)。本項(xiàng)目研究成果和目標(biāo)產(chǎn)品，包括中藥材產(chǎn)地加工技術(shù)規(guī)范、中藥飲片產(chǎn)品、中藥飲片產(chǎn)地加工設(shè)備及中藥飲片生產(chǎn)信息化系統(tǒng)等，產(chǎn)業(yè)化后可以產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟(jì)效益。預(yù)計(jì)本項(xiàng)目相關(guān)產(chǎn)品在未來(lái)10年內(nèi)可占領(lǐng)全國(guó)30%左右的市場(chǎng)份額，按照全國(guó)有100家飲片廠及50家中醫(yī)院應(yīng)用本項(xiàng)目成果計(jì)算，預(yù)計(jì)將產(chǎn)生5-8多億元的市場(chǎng)份額。同時(shí)，本項(xiàng)目通過(guò)直接的產(chǎn)地加工流水線設(shè)備及中藥飲片銷(xiāo)售，項(xiàng)目進(jìn)行期間，可以實(shí)現(xiàn)年銷(xiāo)售額2.5-3億元。

本發(fā)明屬于銑削加工相關(guān)技術(shù)領(lǐng)域，其公開(kāi)了一種五軸加工軌 跡中刀具圓環(huán)體向三角片的邊投影的算法，其包括以下步驟:(1)判斷 刀具圓環(huán)體向三角片的邊投影的特殊情況，若存在特殊情況，則轉(zhuǎn)至 步驟(5)，否則轉(zhuǎn)至步驟(2);(2)根據(jù)第一幾何約束條件來(lái)確定初始迭代 角度;(3)基于第二幾何約束條件及第三幾何約束條件來(lái)計(jì)算及離散初 始迭代角度區(qū)域，以確定較優(yōu)初始迭代角度;(4)基于第二幾何約束條 件及第三幾何約束條件，采用割線法搜索最優(yōu)角度，若成功則轉(zhuǎn)至步 驟(5)，否則結(jié)束;(5)依據(jù)搜索到的所述最優(yōu)角度計(jì)

本發(fā)明公開(kāi)了一種基于二分法的機(jī)床加工穩(wěn)定性邊界快速求解 方法，包括如下步驟:預(yù)設(shè)參數(shù)平面、判穩(wěn)函數(shù)和迭代次數(shù)，對(duì)參數(shù)平面進(jìn)行初步劃分;利用二維二分法將每個(gè)網(wǎng)格再次劃分為更小的子 網(wǎng)格;在每個(gè)子網(wǎng)格的頂點(diǎn)利用數(shù)值積分法求解判穩(wěn)函數(shù)的函數(shù)值， 判斷子網(wǎng)格是否為包含網(wǎng)格;將非包含網(wǎng)格再次劃分并判斷，若仍為 非包含網(wǎng)格，則結(jié)束，否則，獲得新包含網(wǎng)格;利用二維二分法將獲 得的所有包含網(wǎng)格劃分為更小的子網(wǎng)格;重復(fù)進(jìn)行判斷及劃分，逐步 逼近 f(x)曲線，直至達(dá)到預(yù)設(shè)迭代次數(shù);=

11月4日，天津大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院王濤課題組在Journal of Virology在線發(fā)表了最新研究成果，論文題目為“Enterovirus D68 Protease 2AproTargets TRAF3 to Subvert Host Innate Immune Responses”。 腸道病毒EV-D68（Enterovirus D68）可引起典型上呼吸道感染癥狀，同時(shí)還會(huì)誘發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如急性弛緩性麻痹和急性無(wú)力脊髓炎等。近年來(lái)，我國(guó)對(duì)EV-D68的檢出率逐漸升高，存在大規(guī)模暴發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)。腸道病毒的非結(jié)構(gòu)蛋白2A蛋白酶（2Apro）是協(xié)助病毒逃避宿主天然免疫的關(guān)鍵蛋白。 王濤團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)在感染EV-D68后，2Apro可顯著抑制SEV誘導(dǎo)的Ⅰ型干擾素反應(yīng)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，2Apro能夠分別在HeLa和HEK293T細(xì)胞中切割TRAF3的C端區(qū)域，切割后得到的條帶大小為40 kDa左右。同時(shí)，2Apro中第107位氨基酸的半胱氨酸被丙氨酸取代后，喪失對(duì)TRAF3的切割活性，而TRAF3中第462位氨基酸甘氨酸突變?yōu)楸彼釙r(shí)，表現(xiàn)出對(duì)2Apro切割的抗性。 本研究發(fā)現(xiàn)了EV-D68的2Apro能夠切割宿主天然免疫通路中的TRAF3蛋白，從而破壞宿主的先天免疫應(yīng)答，并對(duì)2Apro和TRAF3切割的具體位點(diǎn)和機(jī)制做了詳細(xì)報(bào)道。

項(xiàng)目成果/簡(jiǎn)介:11月4日，天津大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院王濤課題組在Journal of Virology在線發(fā)表了最新研究成果，論文題目為“Enterovirus D68 Protease 2AproTargets TRAF3 to Subvert Host Innate Immune Responses”。 腸道病毒EV-D68（Enterovirus D68）可引起典型上呼吸道感染癥狀，同時(shí)還會(huì)誘發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，如急性弛緩性麻痹和急性無(wú)力脊髓炎等。近年來(lái)，我國(guó)對(duì)EV-D68的檢出率逐漸升高，存在大規(guī)模暴發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)。腸道病毒的非結(jié)構(gòu)蛋白2A蛋白酶（2Apro）是協(xié)助病毒逃避宿主天然免疫的關(guān)鍵蛋白。 王濤團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)在感染EV-D68后，2Apro可顯著抑制SEV誘導(dǎo)的Ⅰ型干擾素反應(yīng)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，2Apro能夠分別在HeLa和HEK293T細(xì)胞中切割TRAF3的C端區(qū)域，切割后得到的條帶大小為40 kDa左右。同時(shí)，2Apro中第107位氨基酸的半胱氨酸被丙氨酸取代后，喪失對(duì)TRAF3的切割活性，而TRAF3中第462位氨基酸甘氨酸突變?yōu)楸彼釙r(shí)，表現(xiàn)出對(duì)2Apro切割的抗性。 本研究發(fā)現(xiàn)了EV-D68的2Apro能夠切割宿主天然免疫通路中的TRAF3蛋白，從而破壞宿主的先天免疫應(yīng)答，并對(duì)2Apro和TRAF3切割的具體位點(diǎn)和機(jī)制做了詳細(xì)報(bào)道。

前期研究發(fā)現(xiàn)一個(gè)海洋真菌來(lái)源的，含有特殊的 N-甲基化和 D-型氨基酸片段的小分子活性環(huán)三肽化 合物 X-13，在動(dòng)物、模式生物和細(xì)胞水平均發(fā)現(xiàn)具有強(qiáng)烈的促血管生成作用；對(duì)大鼠糖尿病潰瘍損傷模 型也具有顯著修復(fù)活性。