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發(fā)現(xiàn)了一系列p53 在維持干細(xì)胞基因組穩(wěn)定性及干性的重要功能及機(jī)制 （Lin et al., 2005, Nat. Cell Biol. 7, 165-171; Song et al., 2007, Nat. Cell. Biol. 9:573-80; Liu et al., 2010, Nat. Cell Biol. 12:993-8; Song et al., 2010, Cell Stem Cell 6, 180-89; Xiong et al., 2015, J Cell Biol. 208:513-20）。本研究成果解釋了p53在某些腫瘤里突變率很高，但在肝癌里突變率很低的原因，為臨床上治療肝癌提供了新思路；同時(shí)對(duì)當(dāng)前腫瘤藥物的研發(fā)起到了警示作用，比如通過增強(qiáng)癌癥患者p53功能的藥物可能會(huì)在無意中導(dǎo)致腫瘤的生長。

本發(fā)明涉及電化學(xué)檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體公開了一種用于檢測腫瘤抑制基因p53的修飾電極及其制備方法。用于檢測P53基因的探針，由一條單鏈DNA輔助探針S1和一條單鏈DNA捕獲探針S2組成，所述S1的DNA鏈序列為：5’-Fc-CTC TCA GTG ATT TTT TTA GTG AGA GAG-(CH2)6-SH-3’，所述S2的DNA鏈序列為：5’-MB-TCA CTG AGT CTT CCA GTG TGA TGA TCA CT-3’。 本發(fā)明所提供的方法制備簡單，操控方便，使用成本低，與毛細(xì)管電泳、變性高效液相色譜、變性梯度凝膠電泳以及酵母中分離的等位基因功能分析技術(shù)等方法相比較，電化學(xué)生物傳感器的方式具有樣品無需前處理，易操控，反應(yīng)條件簡單、成本低等優(yōu)點(diǎn)。腫瘤抑制基因P53是一種被稱為“基因組的守護(hù)者”的抑癌基因，是一系列同工型蛋白質(zhì)（P53蛋白）的同源基因。由該基因編碼的一系列蛋白質(zhì)具有調(diào)控細(xì)胞分裂、修復(fù)和凋亡的作用。國際癌癥基因組協(xié)會(huì)已經(jīng)證明，P53基因是在人類癌癥有關(guān)的基因中突變最為頻繁的基因。在人類已知的所有惡性腫瘤組織中，該基因出現(xiàn)突變的概率在50%以上，是迄今為止人類發(fā)現(xiàn)的與癌癥相關(guān)性最高的基因。因此檢測P53基因?qū)εR床上預(yù)防和治療癌癥有著非常重要的作用，本方法制備簡單，操控方便，使用成本低，在醫(yī)學(xué)上有廣闊的應(yīng)用前景。

 TP53作為最著名的抑癌基因之一，其編碼的p53蛋白控制著一個(gè)廣泛而靈活的生物網(wǎng)絡(luò)，并承擔(dān)著基因組守護(hù)者的角色。TP53基因的缺失或突變與各種癌癥的形成、發(fā)展有著至關(guān)重要的聯(lián)系。正是由于p53蛋白在控制腫瘤中所具有的重要作用，不論是醫(yī)藥企業(yè)還是科研界都在積極地開發(fā)靶向p53生物通路的抗腫瘤候選藥物。本研究利用仿生合成策略首次合成了天然產(chǎn)物rhytidenones家族中化學(xué)結(jié)構(gòu)最為復(fù)雜的rhytidenone A分子，并且運(yùn)用化學(xué)生物學(xué)手段進(jìn)一步闡明了該家族中抗腫瘤活性最強(qiáng)的rhytidenone F的靶點(diǎn)蛋白及生物作用機(jī)制。該研究發(fā)現(xiàn)：rhytidenone F通過共價(jià)作用于蛋白酶體激活因子PA28γ的Cys92位點(diǎn)，從而阻礙了p53蛋白的有效降解，進(jìn)一步導(dǎo)致p53蛋白在細(xì)胞內(nèi)積累，最終激活Fas信號(hào)通路并引起腫瘤細(xì)胞凋亡。該工作揭示了天然產(chǎn)物rhytidenone F作為第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的PA28γ小分子抑制劑，有望成為靶向p53信號(hào)通路的新一代抗腫瘤候選藥物分子；同時(shí)，該分子也可以作為化學(xué)探針，幫助進(jìn)一步研究p53蛋白降解途徑的新的生物機(jī)制。目前正在進(jìn)一步將積極推進(jìn)該候選藥物分子的轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究和臨床前抗腫瘤藥物開發(fā)。

通過檢測少量血液中ctDNA特定位點(diǎn)甲基化水平，對(duì)肝癌進(jìn)行早期診斷及療效和預(yù)后預(yù)測的新方法。ctDNA相當(dāng)于腫瘤細(xì)胞釋放到血液中的身份指紋，由于其攜帶有與原發(fā)腫瘤相一致的甲基化改變，理論上可以利用ctDNA的甲基化譜對(duì)腫瘤進(jìn)行診斷，這一被稱為“液體活檢”（Liquid Biopsy）的新技術(shù)已經(jīng)成為當(dāng)前腫瘤研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一。但是，ctDNA在血液中的含量極微，每毫升血中僅有約20ng，相當(dāng)于一滴水的一億分之一，并且混雜在更大量的正常游離DNA背景中，在這么微量的ctDNA中檢測單個(gè)堿基的甲基化水平，好比在機(jī)場和火車站的數(shù)百萬人流中找到個(gè)別犯罪分子，其難度可想而知。?先后攻克了穩(wěn)定提取微量ctDNA、提高重亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化效率、靶向甲基化PCR擴(kuò)增及測序、海量數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理等一個(gè)個(gè)技術(shù)壁壘，終于從40多萬個(gè)候選位點(diǎn)中分別尋找到10個(gè)早期診斷和療效相關(guān)以及8個(gè)預(yù)后相關(guān)的位點(diǎn)，就像是破獲了肝癌的“身份指紋”，讓早期的肝癌病灶也無所遁形，實(shí)現(xiàn)肝癌早診早治技術(shù)的關(guān)鍵突破。

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