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中性粒細(xì)胞是腫瘤微環(huán)境的重要組成部分，在腫瘤的遠(yuǎn)處器官轉(zhuǎn)移中起著重要作用。既往多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，中性粒細(xì)胞在各種細(xì)胞因子、病原微生物或PMA、LPS等化合物刺激下，會將自身的核酸以及蛋白等物質(zhì)釋放出來，形成以DNA為骨架，鑲嵌著彈性蛋白酶、髓過氧化物酶等顆粒蛋白的網(wǎng)狀樣結(jié)構(gòu)，稱為中性粒細(xì)胞胞外捕獲網(wǎng)（Neutrophil Extracellular Traps, NETs）。最初的研究發(fā)現(xiàn)，NETs可以捕獲病原體，并通過局部高濃度的抗菌蛋白消滅病原體。近年來人們也發(fā)現(xiàn)，NETs里面的DNA成分即NET-DNA也參與了腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。但之前的研究更多的是集中在動物模型，NET-DNA在腫瘤患者遠(yuǎn)處器官轉(zhuǎn)移的作用以及臨床意義仍不明確。此外，NET-DNA促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移的機(jī)制也未得到詳細(xì)的闡述。       該課題組從臨床標(biāo)本出發(fā)，發(fā)現(xiàn)NETs主要浸潤在乳腺癌、結(jié)腸癌患者的肝轉(zhuǎn)移組織，且血清NETs可以預(yù)測早期乳腺癌患者肝轉(zhuǎn)移的發(fā)生，提示在腫瘤發(fā)生肝轉(zhuǎn)移前，NETs可能浸潤于肝組織并促進(jìn)腫瘤肝轉(zhuǎn)移的發(fā)生。 在機(jī)制方面，該課題組發(fā)現(xiàn)NET-DNA可以充當(dāng)趨化腫瘤細(xì)胞運(yùn)動的趨化因子，在不同小鼠模型中，發(fā)現(xiàn)肝臟或者肺組織中的NETs可吸引腫瘤細(xì)胞導(dǎo)致遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的發(fā)生。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞膜上存在NET-DNA受體CCDC25，CCDC25通過識別胞外的NET-DNA，激活I(lǐng)LK-β-parvin細(xì)胞骨架信號通路，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動。既往研究認(rèn)為DNA感受器主要位于胞內(nèi)，該研究首次發(fā)現(xiàn)存在細(xì)胞膜上的DNA感受器。       尚未有研究深入探討CCDC25在腫瘤細(xì)胞中的作用，該蛋白是否可以成為治療靶點(diǎn)更是不為人知。該課題組通過多種模型進(jìn)行驗(yàn)證：1.在乳腺癌自發(fā)成瘤鼠（MMTV-PyMT）中敲除CCDC25； 2.乳腺癌細(xì)胞株以及原代乳腺癌細(xì)胞敲除CCDC25后接種于小鼠；3.在接種乳腺癌細(xì)胞株的小鼠腹腔注射中和抗體。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：靶向CCDC25可以減少乳腺癌遠(yuǎn)處器官轉(zhuǎn)移的發(fā)生。因此，該研究為乳腺癌患者遠(yuǎn)處器官轉(zhuǎn)移提供新的靶點(diǎn)及治療策略。

胃癌在世界范圍內(nèi)和我國均是最常見的惡性腫瘤之一，根據(jù)世界 衛(wèi)生組織公布的全球統(tǒng)計(jì)報(bào)告[1]，全球新發(fā)胃癌 98,9000 例，發(fā)病率 為 17.6/10 萬人，僅次于肺癌居第二位。早期胃癌是病灶局限于胃黏 膜和黏膜下層，不考慮是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，因無明顯癥狀和局部體征， 常不足以引起患者和醫(yī)師的足夠重視而發(fā)生誤診或漏診。 目前，制備腫瘤細(xì)胞單鏈 DNA 適配子的方法主要涉及到隨機(jī)單 鏈 DNA 文庫和引物的構(gòu)建、聚合酶

DNA編碼化合物庫的設(shè)計(jì)及篩選是當(dāng)前新藥發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域最前沿的技術(shù)之一，這種篩選是將目標(biāo)靶點(diǎn)蛋白和整個DNA編碼化合物庫（億級）進(jìn)行篩選。篩選體系中，數(shù)量巨大的化合物對同一靶標(biāo)蛋白競爭性結(jié)合，而非傳統(tǒng)的單個化合物逐一篩選，因此這樣的篩選方式在速度和成本上具有顯著的優(yōu)勢；其次，DNA編碼化合物庫具有非常大的庫容量（百萬到數(shù)百億數(shù)量級），可以涵蓋更為廣泛的化學(xué)空間，對于一些用傳統(tǒng)方法難以篩選的靶點(diǎn)，如蛋白-蛋白相互作用靶點(diǎn)，DEL技術(shù)已經(jīng)顯示出巨大的潛力。目前DEL技術(shù)憑借其庫容量大、篩選速度快的特點(diǎn)，已成為化合物篩選的主流方法之一。當(dāng)前，大型跨國制藥公司都已采用DNA編碼化合物庫技術(shù)進(jìn)行藥物發(fā)現(xiàn)的研究。眾多基于該技術(shù)的新興生物科技公司/平臺涌現(xiàn)出來，如Ensemble therapeutics、X-Chem、DiCE Molecule、NuEvolution、Philochem、先導(dǎo)藥業(yè)、勁宇生物和藥明康德（DEL平臺）等。  硒是一種非金屬化學(xué)元素，位于化學(xué)元素周期表中位于第四周期VI A族（第34號元素）。硒在自然界的存在方式分為兩種：無機(jī)硒和植物活性硒。無機(jī)硒一般指亞硒酸鈉和硒酸鈉，從金屬礦藏的副產(chǎn)品中獲得；植物活性硒是由硒通過生物轉(zhuǎn)化與氨基酸結(jié)合而成，一般以硒蛋氨酸的形式存在。硒可用作光敏材料和電解錳行業(yè)催化劑，也是動物體必需的營養(yǎng)元素和植物有益的營養(yǎng)元素等。作為一種多功能的生命營養(yǎng)素，硒常常用于腫瘤癌癥克山病大骨節(jié)病、心血管病、糖尿病、肝病、前列腺病、心臟病、癌癥等40多種疾病，廣泛運(yùn)用于癌癥、手術(shù)、放化療等。

本發(fā)明公開了一種DNA標(biāo)記用熒光探針及其合成方法和用途，該方法步驟為以乙醇為溶劑，加入摩爾比為1.05～2：1的N-(4-丁磺酸基)-4-甲基喹啉內(nèi)鹽和3-甲酰基-6-(4-乙烯基吡啶)-9-乙基咔唑以及催化量的哌啶，加熱回流4-8小時；反應(yīng)完畢，減壓蒸餾除去溶劑，用硅膠柱層析得到熒光探針。本發(fā)明的DNA標(biāo)記用熒光探針與雙鏈DNA(ds26)有強(qiáng)烈的相互作用，在抗腫瘤藥物合成具有潛在的應(yīng)用價值。本發(fā)明的DNA標(biāo)記用熒光探針具有熒光背景低、與雙鏈DNA(ds26)結(jié)合特異性強(qiáng)、制備簡單和結(jié)構(gòu)穩(wěn)定等特點(diǎn)。

本技術(shù)方法提取的DNA質(zhì)量 高，產(chǎn)率達(dá)0.4ug DNA/g濕土，適 合進(jìn)一步純化以構(gòu)建宏基因組文 庫。

 通過解析蛋白脫底物及其與配體、DNA等一系列晶體結(jié)構(gòu)（圖a-c），該研究揭示了MsmUdgX獨(dú)特的催化過程。研究發(fā)現(xiàn)，MsmUdgX首先對含U底物的 DNA發(fā)生尿嘧啶切除作用，然后其第109位的組氨酸與單鏈DNA底物AP位點(diǎn)的糖環(huán)形成一個共價鍵，因此可以耐受變性劑的作用；同時也由于酶無法再生，從而失去其固有的尿嘧啶酶切活性。該研究共解析了五套 MsmUdgX 的晶體結(jié)構(gòu)，各自代表其催化途徑中不同階段酶所處的狀態(tài)，提出了如圖e所示的催化路徑模型，可能經(jīng)歷一個稱為“oxacarbenium”的中間體。該機(jī)制不但合理解釋了MsmUdgX酶獨(dú)特的生化性質(zhì)，而且發(fā)現(xiàn)酶在反應(yīng)中通過一種“自殺”的方式抑制其自身活性，在已知的UDG酶中尚屬首例。此外，由于MsmUdgX只存在于細(xì)菌中，研究者的MsmUdgX-DNA共價復(fù)合物的結(jié)構(gòu)可能為新型抗菌藥物的設(shè)計(jì)提供新思路，具有潛在的應(yīng)用前景。

黨的十八大提出“建設(shè)五位一體”的總布局，其中生態(tài)文明建設(shè)是基礎(chǔ)；我國正深入實(shí)施“一帶一路”戰(zhàn)略，推動互聯(lián)網(wǎng)與經(jīng)濟(jì)社會各領(lǐng)域的深度融合。本項(xiàng)目在已經(jīng)獲得自主知識產(chǎn)權(quán)的基礎(chǔ)上，整合蘭州大學(xué)在DNA條形碼和深圳市中光遠(yuǎn)科技有限公司在物聯(lián)網(wǎng)智能系統(tǒng)方面的技術(shù)儲備，創(chuàng)制草產(chǎn)品DNA條形碼數(shù)據(jù)庫，構(gòu)建草產(chǎn)品種植生產(chǎn)、檢驗(yàn)、加工包裝和流通等溯源數(shù)據(jù)中心平臺，利用互聯(lián)網(wǎng)整合條形碼序列及生產(chǎn)加工信息構(gòu)建草產(chǎn)品的溯源集成系統(tǒng)。迅速、快捷的追溯草品質(zhì)及質(zhì)量，提高草產(chǎn)品優(yōu)質(zhì)生產(chǎn)和消費(fèi)安全，最終實(shí)現(xiàn)草產(chǎn)品從生產(chǎn)到銷售的全

本發(fā)明公開了屬于農(nóng)業(yè)生物技術(shù)領(lǐng)域的玉米單粒胚乳DNA的提取方法。本發(fā)明先將種子浸泡，然后切去部分胚乳，再加入浸提緩沖液，在55℃水浴后將胚乳研磨；向胚乳中加入CTAB抽提液進(jìn)行抽提，再加入蛋白酶K和醋酸鈉，最后加入飽和酚和氯仿/異戊醇，離心；向上清液中加入異丙醇，離心，用70％乙醇沖洗沉淀，干燥，加入TE中溶解。本發(fā)明方法不破壞種子本身的生活力，切除部分胚乳后仍可育苗移栽，利于進(jìn)行大規(guī)模分子標(biāo)記輔助選擇；其次，本發(fā)明方法提取的DNA濃度高、純度高；此外，本發(fā)明方法可在室內(nèi)對育種后代進(jìn)行分子標(biāo)記輔助選擇，工作效率高，節(jié)約人力、物力和財(cái)力；最后，本發(fā)明被切割種子被感染發(fā)霉的概率低，育苗成功率高。

該項(xiàng)目獲得2022年第五屆上海科技大學(xué)創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)大賽生命學(xué)科賽場教師組三等獎；獲得2019年第二屆上海科技大學(xué)創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)大會創(chuàng)新組三等獎。

本發(fā)明涉及電化學(xué)檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體公開了一種用于檢測腫瘤抑制基因p53的修飾電極及其制備方法。用于檢測P53基因的探針，由一條單鏈DNA輔助探針S1和一條單鏈DNA捕獲探針S2組成，所述S1的DNA鏈序列為：5’-Fc-CTC TCA GTG ATT TTT TTA GTG AGA GAG-(CH2)6-SH-3’，所述S2的DNA鏈序列為：5’-MB-TCA CTG AGT CTT CCA GTG TGA TGA TCA CT-3’。 本發(fā)明所提供的方法制備簡單，操控方便，使用成本低，與毛細(xì)管電泳、變性高效液相色譜、變性梯度凝膠電泳以及酵母中分離的等位基因功能分析技術(shù)等方法相比較，電化學(xué)生物傳感器的方式具有樣品無需前處理，易操控，反應(yīng)條件簡單、成本低等優(yōu)點(diǎn)。腫瘤抑制基因P53是一種被稱為“基因組的守護(hù)者”的抑癌基因，是一系列同工型蛋白質(zhì)（P53蛋白）的同源基因。由該基因編碼的一系列蛋白質(zhì)具有調(diào)控細(xì)胞分裂、修復(fù)和凋亡的作用。國際癌癥基因組協(xié)會已經(jīng)證明，P53基因是在人類癌癥有關(guān)的基因中突變最為頻繁的基因。在人類已知的所有惡性腫瘤組織中，該基因出現(xiàn)突變的概率在50%以上，是迄今為止人類發(fā)現(xiàn)的與癌癥相關(guān)性最高的基因。因此檢測P53基因?qū)εR床上預(yù)防和治療癌癥有著非常重要的作用，本方法制備簡單，操控方便，使用成本低，在醫(yī)學(xué)上有廣闊的應(yīng)用前景。