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L-纈氨酸是生命有機(jī)體的重要組成部分，在生命體內(nèi)物質(zhì)代謝調(diào)控和信息傳遞等許多方面扮演著重要角色。L-纈氨酸屬于八種必需氨基酸之一，也是三種支鏈氨基酸之一。L-纈氨酸發(fā)酵是典型的代謝控制發(fā)酵。國內(nèi)雖有天然蛋白質(zhì)水解液分離提取 L-纈氨酸的產(chǎn)品，但由于其產(chǎn)量很低，質(zhì)量不佳，純度不高，所以無法實(shí)現(xiàn)大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。利用微生物發(fā)酵法生產(chǎn) L-纈氨酸具有原料成本低，反應(yīng)條件溫和及易實(shí)現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)，是一種非常經(jīng)濟(jì)的生產(chǎn)方法。但是， 以微生物發(fā)酵法生產(chǎn) L-纈氨酸，國內(nèi)大多數(shù)菌株的產(chǎn)酸水平不高，特別是 L-纈氨酸的生產(chǎn)水平和產(chǎn)量遠(yuǎn)不能滿足國內(nèi)市場的需求。因此，開展發(fā)酵法生產(chǎn) L-纈氨酸的研究具有極其重要的意義。本研究室通過高通量篩選策略，獲得一株高產(chǎn)纈氨酸的黃色短桿菌。 

C8H9NO3；左旋-α-對羥基苯基氨基乙酸是β-內(nèi)酰胺類半合成抗生素的側(cè)鏈重要原料，是新型廣譜抗生素阿莫西林（Amoxicillin），阿撲西林（Aspoxicillin）、頭孢哌酮（Cefoperazone），頭孢羥氨芐（Cefodroxil）、頭孢羅齊（Cefoprozil）等藥物的必不可少的重要中間體，其在醫(yī)藥工業(yè)上應(yīng)用廣泛，發(fā)展前途廣闊。同時(shí)，它還應(yīng)用于感光領(lǐng)域和用作鐵、磷、硅等的分析試劑。   開發(fā)的本課題已經(jīng)過湖北省化工行業(yè)辦鑒定，技術(shù)處于國內(nèi)領(lǐng)先水平。本課題已作為湖北省科技攻關(guān)項(xiàng)目。

在泡騰飲料、泡騰藥物和膨松食品中，一甘氨酸鈉碳酸鹽（mono-SGC）是較理想的二氧化碳?xì)怏w的來源。與其它用作發(fā)泡劑的無機(jī)化合物（比如碳酸氫鈉）相比較，一甘氨酸鈉碳酸鹽有更優(yōu)越的理化性質(zhì)和應(yīng)用范圍。一甘氨酸鈉碳酸鹽分解后的產(chǎn)物是甘氨酸和二氧化碳。甘氨酸是人體必須的氨基酸，可用來治療胃酸過多與肌力衰竭，在膠原中的含量為25%-30%。所以一甘氨酸鈉碳酸鹽用作藥物和食品中的發(fā)泡劑較為安全。一甘氨酸鈉碳酸鹽在國外已應(yīng)用于食品和醫(yī)藥工業(yè)中，一項(xiàng)美國專利報(bào)道了一甘氨酸鈉碳酸鹽的制備，但產(chǎn)率只有77%。用我們改進(jìn)的方法合成一甘氨酸鈉碳酸鹽產(chǎn)率可達(dá)90%。

谷氨酸棒桿菌(Corynebacterium glutamicum)被廣泛用于食品工業(yè)生產(chǎn)，是一種安全性很高的工業(yè)菌株；具有包括 Sec 和 Tat 分泌途徑在內(nèi)完善的蛋白分泌系統(tǒng)；沒有類似于大腸桿菌(E. coli)所帶來的內(nèi)毒素和宿主細(xì)胞蛋白污染等問題。這些顯著優(yōu)點(diǎn)使它成為一種有吸引力的外源蛋白表達(dá)生產(chǎn)用的底盤細(xì)胞。目前國內(nèi)生物醫(yī)藥領(lǐng)域主要依賴于 E.coli 表達(dá)體系生產(chǎn)醫(yī)藥蛋白，原創(chuàng)性外源蛋白表達(dá)體系的缺失，在知識產(chǎn)權(quán)方面將制約到我國生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。該項(xiàng)成果有望為我國生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)提供一個(gè)具有自主知識 產(chǎn)權(quán)的谷氨酸棒桿菌安全高效外源蛋白表達(dá)體系。

項(xiàng)目研究背景： 該工藝以廉價(jià)的 L-Cbz-蛋氨酸為原料， 經(jīng)內(nèi)酯化反應(yīng) 得到關(guān)鍵的中間體 N-Cbz-L- 高絲氨酸內(nèi)酯， 再與丙基溴反應(yīng)對羧基進(jìn)行保 護(hù)得到羥基丁酸丙酯衍生物，然后 PBr3 作為鹵化試劑發(fā)生鹵化反應(yīng)，引 入溴離子離去基，含有離去基的側(cè)鏈與 N-羥基鄰苯二甲酰亞胺發(fā)生 N-烷 化反應(yīng)，引入 NH2-O 健，接著在濃鹽酸中脫去保護(hù)基并發(fā)生水解酞酰亞 胺反應(yīng)，得到含有

       上海頎高儀器有限公司始創(chuàng)于1986年，是由原上海石油儀器廠和武漢理工大學(xué)資深技術(shù)專家組成，是以研制、生產(chǎn)、銷售石油化工及煤化工領(lǐng)域分析儀器的專業(yè)生產(chǎn)廠商。產(chǎn)品適用于石油、電力、化工、科研、質(zhì)檢及大專院校等相關(guān)行業(yè)領(lǐng)域。本公司研制生產(chǎn)的常規(guī)化工分析及專用實(shí)驗(yàn)室儀器十三個(gè)系列，共260余種。同時(shí)每年還應(yīng)對市場及用戶的各種個(gè)性需求，單獨(dú)開發(fā)和定制生產(chǎn)非標(biāo)類特殊用途的儀器約20余種。上海頎高是國內(nèi)同行業(yè)中產(chǎn)品門類最全、配套能力最強(qiáng)、發(fā)展速度最快的企業(yè)之一。公司堅(jiān)定嚴(yán)格按照國標(biāo)行標(biāo)的試驗(yàn)方法規(guī)定，絕不靠偷工減料來降低成本，保證儀器部件尺寸精度以及材料性能，真正讓用戶實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)滿足重復(fù)性和精密度的要求。近年來我司產(chǎn)品精細(xì)獨(dú)特的設(shè)計(jì)，節(jié)能可靠的系統(tǒng)，均被工礦企業(yè)、鐵路部隊(duì)、科研院校和質(zhì)監(jiān)部門廣泛采用，受到用戶一致好評。公司內(nèi)部已實(shí)施CRM、ERP項(xiàng)目管理，為產(chǎn)品品質(zhì)及企業(yè)的長遠(yuǎn)發(fā)展提供了強(qiáng)有力的保障。面對未來，頎高人堅(jiān)守“嚴(yán)謹(jǐn)、求實(shí)、高效、創(chuàng)新、合作、發(fā)展”的企業(yè)精神，精益求精，以一流的產(chǎn)品、優(yōu)質(zhì)的服務(wù)滿足客戶需求，為促進(jìn)提高民族分析儀器工業(yè)的振興發(fā)展作出貢獻(xiàn)。 　  多年來，公司非常注重新技術(shù)、新工藝、新器件、新材料的應(yīng)用，不斷提升公司儀器的自動化、智能化水平。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，目前公司儀器中使用單片機(jī)技術(shù)或筆記本電腦進(jìn)行控制測量、分析計(jì)算的儀器，已經(jīng)達(dá)到近100種。儀器的技術(shù)含量和技術(shù)檔次得到極大的提高，深受國內(nèi)外用戶的歡迎。多年的研發(fā)和實(shí)踐，讓上海頎高儀器更加精致穩(wěn)定，更加符合國標(biāo)及行標(biāo)的試驗(yàn)要求。公司秉承“以人為本，科技創(chuàng)新”的理念，將銷售收入的10%～15%用于研發(fā)，致力于將產(chǎn)品升級換代至世界一流水準(zhǔn)。依靠“高、精、尖“的科技人才隊(duì)伍及運(yùn)用行業(yè)領(lǐng)先的開發(fā)手段，使得頎高產(chǎn)品質(zhì)量更有保障，品種不斷更新，始終處于行業(yè)領(lǐng)先地位。        未來的一年，我們?nèi)詫⒕ぞI(yè)業(yè)，樂于研發(fā)，不斷提升，生產(chǎn)出質(zhì)量更好、性能更完備的油品儀器，來滿足市場和答謝各位朋友的關(guān)心與支持。同時(shí)繼續(xù)秉承“質(zhì)量優(yōu)、服務(wù)好、價(jià)格適中”的宗旨，竭誠向各位新老用戶提供質(zhì)量優(yōu)異的石油化工及煤化工分析儀器和良好的售后服務(wù)。歡迎各界人士惠顧考察與指導(dǎo)！

通過微生物育種和基因工程手段相結(jié)合，獲得了一株脯氨酸高產(chǎn)菌株黃色短桿菌。發(fā)酵培養(yǎng) 65~68 h， L-脯氨酸產(chǎn)量高達(dá) 100 g/L，葡萄糖得率為 45%左右。 關(guān)鍵技術(shù) (1)本研究以玉米漿為氮源，有效的降低了發(fā)酵成本； (2)以葡萄糖和味精為原料生產(chǎn) L-脯氨酸的高轉(zhuǎn)化率發(fā)酵，該法綠色、環(huán)保、可持續(xù)，具有經(jīng)濟(jì)競爭力，有很好的產(chǎn)業(yè)應(yīng)用前景。

γ-聚谷氨酸（Poly-γ-glutamic acid）是一種重要的天然聚合物，由 于其具有良好的性質(zhì)已被廣泛應(yīng)用于食品，化妝品，醫(yī)藥，材料等領(lǐng) 域。解淀粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliquefaciens）LL3 是一株谷氨酸 非依賴型 γ-PGA 合成菌。為了提高其 γ-PGA 產(chǎn)量，項(xiàng)目組采用無痕 基因編輯技術(shù)對菌株進(jìn)行了代謝工程改造。包括三部分：模塊化代謝 通路改造；蔗糖代謝途徑改造；谷氨酸合成途徑改造。 B. amyloliquefaciens LL3 是項(xiàng)目組從發(fā)酵食品中分離得到，它能 夠從蔗糖出發(fā)合成 γ-PGA。利用模塊化通路改造策略對 γ-PGA 合成 相關(guān)的八個(gè)代謝通路進(jìn)行改造包括：γ-PGA 降解相關(guān)途徑；細(xì)胞呼吸 鏈；胞外蛋白及胞外蛋白酶合成途徑；細(xì)菌多糖合成途徑；次級小分 子代謝產(chǎn)物合成途徑；細(xì)胞自誘導(dǎo)因子合成途徑；谷氨酸合成途徑以 及 γ-PGA 合成途徑。最終整合獲得的最優(yōu)基因工程菌株 NK-anti-rocG （敲除了 epsA-O 操縱子（負(fù)責(zé)胞外多糖合成），sac 操縱子（負(fù)責(zé)果 聚糖合成），lps（脂多糖合成相關(guān)），pta（乙酸合成相關(guān)），pgdS（γ-PGA 降解酶），cwlO（細(xì)胞壁水解酶），luxS（AI-2 合成）以及表達(dá) anti-rocG sRNA（抑制谷氨酸脫氫酶表達(dá)））γ-PGA 搖瓶發(fā)酵產(chǎn)量從 3.8 g/L 提高到 11.04 g/L，較對照菌株提高了 2.91 倍。γ-PGA 產(chǎn)物純度也 從 78.6%提高到 95.2%。5-L 罐補(bǔ)料分批發(fā)酵實(shí)驗(yàn)得到 NK-anti-rocG 菌株產(chǎn)量可達(dá) 20.3 g/L。分子量 450,000 Dal，純度 95%以上。 項(xiàng)目特色： 1. 菌種（Bacillus amyloliquefaciens）LL3 是谷氨酸非依賴型 γ-聚谷 氨酸合成菌株；發(fā)酵生產(chǎn)主要原料為蔗糖； 2. 補(bǔ)料分批發(fā)酵產(chǎn)量為：20.3 g/L。 3. 授權(quán)專利號為：ZL200810053900.7 市場應(yīng)用前景： γ-聚谷氨酸（Poly-γ-glutamic acid）是一種重要的天然聚合物，由 于其具有良好的性質(zhì)已被廣泛應(yīng)用于食品，化妝品，醫(yī)藥，材料等領(lǐng) 域。本項(xiàng)目采用谷氨酸非依賴型 γ-聚谷氨酸合成菌做為發(fā)酵菌種，以 蔗糖為原料發(fā)酵法生產(chǎn) γ-聚谷氨酸，可產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟(jì)效益和社會效 益。

項(xiàng)目簡介 作為一種主要的蛋白質(zhì)翻譯后修飾，賴氨酸側(cè)鏈乙?；耙阴Ｙ嚢彼醾?cè)鏈去乙酰化 已在近年證明能有效地調(diào)節(jié)多個(gè)關(guān)鍵生命過程，并且也已證明是發(fā)展人類疾病藥物（特 別是癌癥）的新型生物靶點(diǎn)。本成果發(fā)展了兩個(gè) Fmoc 保護(hù)的乙酰賴氨酸類似物（即 Fmoc硫乙酰賴氨酸和 Fmoc-甲磺酰賴氨酸）的有效制備方法及其成功應(yīng)用于基于 Fmoc 化學(xué)的 固相多肽合成。本課題組的前期工作已表明含有這兩個(gè)乙酰賴氨酸類似物的肽及肽類化 合物能作為發(fā)展下一代抗癌藥物的全新起點(diǎn)以及作為更近一步研究蛋白質(zhì)乙

用本方法制出的反芻動物飼料添加劑瘤胃保護(hù)性賴氨酸鹽酸鹽微膠囊包衣產(chǎn)品，可減少了賴氨酸在瘤胃中的降解，增加了小腸中賴氨酸的數(shù)量，克服了賴氨酸鹽酸鹽防潮性能差和存貯不便的缺點(diǎn)。本方法具有時(shí)間短、包衣效率高、制粒均勻等優(yōu)點(diǎn)。