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可以量產(chǎn)/n針對當前工業(yè)發(fā)展對脂肪酶的大量需求與脂肪酶實際表達水平較低 的技術(shù)瓶頸，突破了脂肪酶超高效表達技術(shù)關(guān)鍵，建立了真菌脂肪酶高 效表達技術(shù)平臺，構(gòu)建的米根霉脂肪酶基因工程菌 10L 發(fā)酵酶活力可達 40,000U/ml 以上，為當前報道的最高水平，具有極強的國際競爭力。產(chǎn) 品可用于油脂水解、轉(zhuǎn)酯，食品加工、烘焙，生物柴油制備，飼料添加 劑，再生紙脫墨等廣泛用途。建設(shè)其發(fā)酵生產(chǎn)線預(yù)計需要 800-1000 萬元，經(jīng)濟效益可觀。米根霉脂肪酶可用于油脂水解、轉(zhuǎn)酯，食品加工、烘焙，生物柴油

油脂精煉過程中，脫膠是非常重要的一步工序，脫膠效果的好壞直接影響到油脂精煉的效率和最終產(chǎn)品的質(zhì)量。傳統(tǒng)的脫膠方法常存在產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定、消耗大、得率低、“三廢”排放量大等問題。酶法脫膠工藝是現(xiàn)代工業(yè)生物催化技術(shù)在傳統(tǒng)油脂行業(yè)中的應(yīng)用，是對現(xiàn)有化學(xué)或物理脫膠工藝的改進，以提高其經(jīng)濟性和環(huán)保性，有著廣泛的發(fā)展前景和重要的經(jīng)濟和社會價值。本技術(shù)以自行篩選所得菌株BIT-18表達的磷脂酶為對象，開發(fā)了該磷脂酶在大豆油、菜籽油等常見油脂酶法脫膠中的應(yīng)用，已完成了實驗室工藝優(yōu)化，建立了適于工廠規(guī)模油脂酶法脫膠工藝

糖化酶是糖化工業(yè)的重要酶制劑，但生產(chǎn)上的主要問題是：酶活力低、沒有常溫條件下的酶產(chǎn)品（使得糖化工藝中需要消耗大量能源）。利用定向進化技術(shù)獲取較低溫度下活力提高數(shù)倍~數(shù)十倍的新的酶分子、并確定新基因序列，轉(zhuǎn)化受體菌。 我們的技術(shù)優(yōu)勢：基因分離技術(shù)是我們的優(yōu)勢，已報道全長基因序列15條，在天津基金資助下最近已克隆了糖化酶基因。定向進化是我們目前的主要研究方向之一，在留學(xué)回國科研啟動基金資助下對谷胱苷肽-S-轉(zhuǎn)移酶脫氯活性進行提高，已有研究進展。

全自動酶標儀318C+廣泛用于各大高?？蒲袡C構(gòu)、技術(shù)質(zhì)量監(jiān)督局、動植物檢疫及食品飼料行業(yè)等，除開展血液學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤免疫學(xué)、傳染病免疫學(xué)、TORCH感染免疫學(xué)、基因檢驗項目外、還可以對食品安全三聚氰胺、黃曲霉素、農(nóng)藥殘留、獸藥殘留等所有采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（Elisa）進行項目檢驗，并且有相應(yīng)版本的軟件支持。   產(chǎn)品特點： 1、內(nèi)置嵌入式系統(tǒng)，無需外接電腦即可操作、存儲、打印; 2、測量模式：單波長檢測，雙波長檢測，兩點法，動力學(xué)法，酶抑制率，終點法、速率法。 3、*可選擇吸光度、Cut-Off定性計算、單點定標、折線回歸、線性回歸、指數(shù)回歸、對數(shù)回歸、雙對數(shù)回歸、log-logit、冪回歸、四參數(shù)回歸、酶抑制率等計算方法；  4、在同一板上可進行多至12個不同項目的測試，并可同一板檢測定性和定量項目。 5、*全面完善的質(zhì)控功能，包含westguard多規(guī)則質(zhì)控，即刻法質(zhì)控等多種質(zhì)控圖及質(zhì)控參數(shù)計算，具有質(zhì)控報警功能。   技術(shù)參數(shù)： 1、*波長范圍： 400-800nm 2、*濾光片配置：10個濾光片位置，標配405nm、450nm、492nm、630nm,選配6定制波長 3、吸光度范圍：0.000―4.000A 4、*光通道數(shù)：8通道光路檢測，另設(shè)一個獨立參比通道（選配） 5、示值穩(wěn)定性：≤±0.002A或≤0.5%T/10min。 6、示值誤差（準確性）：≤±0.005A或±0.2%T。 7、重復(fù)性：≤0.2%或≤0.2%T。 8、靈敏度：≥0.01（L/mg）。 9、通道差異：≤0.01A。 10、波長示值誤差：±1nm 11、半寬度：≤8nm 12、分辨率：0.001A（顯示），0.0001A（內(nèi)部計算） 13、*讀板速度：單波長≤3秒/96孔，雙波長≤6秒/96孔 14、振板功能：速度和時間可調(diào) 15、光源類型：進口鹵鎢燈 16、板條類型：標準96孔或其他型酶標板、條 17、適用孔型：平底、U型和V型 18、顯示方式：7寸彩色液晶顯示屏顯示 19、輸入方式：觸摸屏輸入，可選配鼠標和鍵盤 20、打?。簝?nèi)置熱敏打印機，可外接打印機 21、數(shù)據(jù)儲存：200,000個測試數(shù)據(jù)，500個以上測試項目（可擴展） 22、接    口： USB(A)口、USB(B)口、串口、并口 23、使用環(huán)境：溫度5-40℃；濕度15%-80% 24、電源電壓：220V±10%，50/60Hz 25、體積：475mm×350mm×210mm（長×寬×高） 27、重量：11.5Kg

低聚異麥芽糖作為一種健康糖源和功能性食品添加劑廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品和飼料添加劑行業(yè)中。在低聚異麥芽糖的制備過程中，α-葡萄糖苷酶的轉(zhuǎn)糖苷作用是關(guān)鍵步驟。目前國內(nèi)用于低聚異麥芽糖生產(chǎn)的α-葡萄糖苷酶大多為進口品。本項目獲得的?-葡萄糖苷酶生產(chǎn)菌株發(fā)酵液酶活達到 11 U/mL，為國內(nèi)外現(xiàn) 有報道中的最高水平，發(fā)酵工藝簡單易控。重組菌發(fā)酵液經(jīng)過濾除菌并濃縮后可以直接作為酶液進行轉(zhuǎn)化。酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)低聚異麥芽糖轉(zhuǎn)化率與進口酶相似，可以替代進口品。 

本項目針對上述問題，從分子、細胞和個體水平三個層面上研究人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)生物學(xué)行為及相關(guān)技術(shù)的臨床應(yīng)用，旨在提高兒童腫瘤療效。 1、主要科技內(nèi)容和技術(shù)特點： 1） 率先在國內(nèi)外建立RT-PCR和實時定量RT-PCR檢測hTERT法，該法簡便、快速、經(jīng)濟、安全，適用于臨床推廣應(yīng)用。該項技術(shù)已經(jīng)應(yīng)用于兒童惡性腫瘤診斷、監(jiān)測和指導(dǎo)個體化治療，提高了兒童腫瘤的診療水平。 2）首次在國內(nèi)外研究體內(nèi)造血干細胞hTERT的生物學(xué)行為，證明了hTERT與促紅細胞生成素的關(guān)系，并系統(tǒng)研究了惡性腫瘤細胞hTERT的生物學(xué)行為， 探討腫瘤細胞中Aurora A與hTERT及端粒酶表達的相關(guān)性，提出hTERT與細胞因子網(wǎng)絡(luò)紊亂相互作用促進腫瘤發(fā)生和發(fā)展的新觀點，為惡性腫瘤在分子水平上的監(jiān)測和以hTERT為靶點的生物工程治療提供了依據(jù)。 3） 在國內(nèi)外首次闡明端粒酶重建對成纖維細胞遷移能力和生物節(jié)律的調(diào)控，把端粒酶、hTERT生物學(xué)行為和生物節(jié)律與腫瘤擇時治療有機結(jié)合，為腫瘤治療提供了一條新路徑。實踐證明，在該理論指導(dǎo)下進行化療，可明顯提高腫瘤化療效果，且毒副作用明顯減少。

CRISPR/Cas9 (clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associated proteins)是目前最常用的基因編輯工具酶，在科研領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用，而在臨床方面的應(yīng)用因為其脫靶活性一度停滯不前。它通過guide RNA（gRNA）與靶向DNA序列的配對，從而將Cas9錨定在靶向基因并誘導(dǎo)產(chǎn)生DNA雙鏈斷裂（DSB）。在基因編輯誘發(fā)的DSB的修復(fù)過程中，一定幾率會產(chǎn)生基因突變或者外源DNA片段的插入，從而達到基因編輯的目的。在實際應(yīng)用過程中，一個好的基因編輯酶Cas9需要同時滿足高效切割靶位點、低脫靶活性和低染色體異常三個特點。目前在這三個方面，有一部分基于PCR的方法用于估算基因編輯效率，但其結(jié)果可靠性有待提高；有一些基于高通量測序的方法可以在體內(nèi)或者體外檢測基因編輯酶的脫靶活性；尚無系統(tǒng)的可定量的測量基因組異常結(jié)構(gòu)的方法。本項目開發(fā)了一種新的方法，可以用來同時定量檢測Cas9編輯效率和脫靶活性以及編輯引起的染色體異常結(jié)構(gòu)，即primer-extension-mediated sequencing（PEM-seq）。這是對基因編輯和DNA損傷修復(fù)等領(lǐng)域都有巨大促進作用的新技術(shù)。與此同時，該項目包括了該團隊利用PEM-seq篩選出的一個相比于現(xiàn)有Cas9變體具有更低脫靶活性且與野生型Cas9切割效率相當?shù)腃as9變體further enhanced Cas9 (FeCas9)。

發(fā)酵香腸是一類高檔肉制品，以其風(fēng)味受到消費者歡迎。本技術(shù)利用酶法促 進發(fā)酵香腸生產(chǎn)過程中風(fēng)味的形成，在保持產(chǎn)品原有風(fēng)味、香型不變的情況下， 使其風(fēng)味物質(zhì)形成量增大 7 倍（以 GC/MS 出峰面積計），生產(chǎn)時間明顯縮短，產(chǎn) 品風(fēng)味更濃、持久性更強。

5’-核苷酸為生物體內(nèi)重要的生化物質(zhì)，參與多種生理生化反應(yīng)。本項目即利用核糖核酸（RNA）為原料，通過酶催化反應(yīng)生成四種5’－核苷酸，再經(jīng)分離純化，最后獲得高品位的5’－腺苷酸（5’－AMP）、5’－鳥苷酸（5’－GMP）、5’－胞苷酸（ ’－CMP）和5’－尿苷酸（5’－UMP）等四種5’－核苷酸產(chǎn)品。這四種核苷酸目前作為營養(yǎng)強化劑，添加到嬰兒配方奶粉中，或作為各種核酸藥物中間體。 本項目的特點是：1）提取高活力的磷酸二酯酶，代替桔青霉直接發(fā)酵液，大大減少了設(shè)備投資及生產(chǎn)成本，有效地消除了對環(huán)境的污染；2）通過對酶的預(yù)處理，有效地控制了酶反應(yīng)過程中的副反應(yīng)，使核苷酸轉(zhuǎn)化率明顯提高；3）通過新型離子交換樹脂的有序排列組合，可一次分離純化得到高純度單核苷酸，技術(shù)上收率達80%以上；4）使用本項目生產(chǎn)出來的產(chǎn)品，含量和純度均可達 %以上。達到國外先進水平。

已有樣品/n針對酶在工程化應(yīng)用中的缺陷，如易失活、不具回收性、抗逆性差 等，采用新型固定化技術(shù)，制備出具有高活性、高耐逆和工程化回用性 良好的固定化脂肪酶，提高酶活力 10-46 倍。如：以碳納米管為載體整 合其它方法固定化 BCL，固定化酶最大蛋白比活達 50,200 U/min/g protein，酶活回收率達 3,740%，為游離酶的 54 倍，是 MPR-NKA 固定化 酶的 1.5 倍，且大幅縮短了酶促反應(yīng)時間，10 分鐘就能使手性拆分反應(yīng) 達到平衡，較國際報道的最高水平提高 200 倍，