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其他成果/n一種酶法制備有機菜籽多肽的方法，包括：菜籽蛋白的制備；將菜籽蛋白與蒸餾水按一定料液比混勻，并進行超聲輔助濕熱處理，得到濕熱菜籽蛋白漿液；向濕熱菜籽蛋白漿液中加入三聚磷酸鈉進行超聲輔助磷酸化處理，得到磷酸化菜籽蛋白漿液；調(diào)節(jié)磷酸化菜籽蛋白漿液的pH和溫度，并加入堿性蛋白酶進行超聲輔助酶解，得到一次酶解液；調(diào)節(jié)一次酶解液的pH和溫度，并加入復(fù)合風(fēng)味蛋白酶進行超聲輔助酶解，得到二次酶解液；對二次酶解液進行微波滅酶處理，得到滅酶酶解液，將滅酶酶解液離心得到菜籽多肽清液，再進行冷凍干燥處理，即得成品的有機菜籽多肽。該酶法制備有機菜籽多肽的方法，工藝安全、制備便捷。

該技術(shù)是利用鵝源草酸青霉果膠酶生產(chǎn)磁性固定化鵝源草酸青霉果膠酶， 技術(shù)適用于食品、醫(yī)藥、畜禽飼料生產(chǎn)企業(yè)。 技術(shù)利用混合共沉淀法制備果膠酶納米級磁性高分子微球載體，利用超聲 波技術(shù)彌補共沉淀法中粒徑不均勻的不足，有效控制粒徑的大小，提高了微粒青島農(nóng)業(yè)大學(xué)科技成果介紹 2017 －42－ 作為載體的靶向性；采用真空冷凍干燥技術(shù)處理固定化鵝源草酸青霉果膠酶， 減少了采用鼓風(fēng)加熱干燥常規(guī)法造成載體中羥基、羧基官能團的活性損失，使 制備的載體中有效官能團回收率更高。另外，以磁性 Fe3O4 為磁核，殼聚糖-阿 拉伯膠為磁殼制備磁性雙酶(果膠酶+纖維素酶)復(fù)合微球，使磁性雙載體雙酶固 定化產(chǎn)品的連續(xù)重復(fù)利用效果更好，具有良好的熱穩(wěn)定性。研發(fā)的磁性高分子 微球粒徑為 10～80.45nm，具有良好的磁響應(yīng)性，能夠?qū)崿F(xiàn)均勻酶解、重復(fù)利用。

化學(xué)學(xué)院歐陽鋼鋒教授團隊揭示封裝模式是如何影響酶@MOFs的生物功能，并提供一種新的策略可制備具有高生物活性的酶@MOFs材料。研究人員以6種工業(yè)用途廣泛的酶為模型（括葡萄糖氧化酶(GOx)、細胞色素C (Cyt C)、辣根過氧化物酶(HRP)、過氧化氫酶(CAT)、尿酸氧化酶(UOx)和乙醇脫氫酶(ADH)），研究了它們原位封裝于ZIF-8空腔后的活性轉(zhuǎn)化。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)部分酶可保持較高的生物活性，但另一部分酶活性則嚴重下降甚至完全失活。接著，研究人員通用過系統(tǒng)的表征手段發(fā)現(xiàn)酶的活性轉(zhuǎn)化與其封裝模式密切相關(guān)：1）在基于酶誘導(dǎo)ZIF-8成核驅(qū)動的快速封裝模式中，得到的酶@ZIF-8保持較高的生物活性；2）在ZIF-8自然成核的共沉淀緩慢封裝模式中（此過程中酶不參與ZIF-8成核），由于過量配體（2-甲基咪唑）的去折疊效應(yīng)和競爭配位，得到的酶@ZIF-8趨向于失活（圖1A）。有趣的是，這兩種封裝模式與酶的表面電荷性質(zhì)有關(guān)。研究人員通過酶表面氨基酸殘基的化學(xué)修飾調(diào)節(jié)酶的表面電荷，可實現(xiàn)酶@ZIF-8封裝方式的有效調(diào)控，進而改善酶@MOFs的生物活性。接著，研究人員探討了改善后的酶@MOFs（Cyt C-A@ZIF-8和HRP-A@ZIF-8）在生物傳感領(lǐng)域的應(yīng)用。我們首先可以利用Cyt C-A@ZIF-8和HRP-A@ZIF-8對H2O2進行可視化傳感。谷胱甘肽(GSH)是一種生物硫醇，與糖尿病、肝病、白內(nèi)障、阿爾茨海默病和帕金森病等多種病癥相關(guān)。H2O2可氧化GSH進而影響酶@MOFs的H2O2傳感性能(圖1B)。鑒于這一原理，我們建立了一種GSH的可視化酶@MOFs傳感平臺，并具有較高的檢測靈敏度和較寬的線性范圍（圖1C）。與單酶催化相比，多酶催化級聯(lián)反應(yīng)是生物體內(nèi)一類重要的化學(xué)轉(zhuǎn)化過程，在生物信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和代謝途徑中起著關(guān)鍵作用。研究人員將多種酶（GOx和HRP）共封裝于MOFs（簡稱ECMN，圖1D），模擬細胞內(nèi)級聯(lián)催化過程；同時，可以通過調(diào)控酶的封裝模式，提高ECMN的級聯(lián)催化性能（圖1E），并實現(xiàn)葡萄糖的高靈敏、可視化檢測? 此外，研究團隊從封裝策略及應(yīng)用兩方面總結(jié)了酶@MOFs的最新研究進展：重點介紹了MOFs孔徑結(jié)構(gòu)和酶生物界面與金屬離子的相互作用對酶封裝效率的影響及影響酶活性轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵因素；并展示了酶@MOFs在生物傳感、催化和納米催化治療等領(lǐng)域的前沿應(yīng)用。

(S)-丁呋洛爾化學(xué)名為(S)-1-(7-乙基苯并呋喃-2-基)-2-叔丁基氨基-1-乙醇，被廣泛用作研究細胞色素P450(CYP)酶的底物，對β-腎上腺素受體具有無選擇性阻滯作用，可用于治療輕、中度高血壓。以往制備光學(xué)純的(S)-丁呋洛爾的方法主要是酯化拆分和化學(xué)催化不對稱氫化還原，這兩種方法均存在原料利用率低或成本昂貴等問題。本技術(shù)利用(R)-醇腈酶((R)-Oxynitrilase)作為一種生物催化劑具有的高效手性轉(zhuǎn)化能力，通過催化不對稱氰化反應(yīng)獲得制備(S)-丁呋洛爾的關(guān)鍵手性中間體，開發(fā)出一條新的(S)-丁呋洛爾合成路線。

超氧化物歧化酶(SOD)是一種源于生命體的活性物質(zhì)，能消除生物體在新 陳代謝過程中產(chǎn)生的超氧陰離子自由基。慢性炎癥的主要產(chǎn)物之一是超氧陰離 子自由基，因此目前慢性咽炎還沒有有效的治療藥物或功能產(chǎn)品。本項目是基 于 SOD 的作用機制和慢性咽炎的發(fā)生機制，研制含 SOD 的含片，以達到清咽 和根治慢性咽炎的目的；咽炎的發(fā)病率高，藥物需求量大，經(jīng)濟效益和社會效 益好。本項目已完成 SOD 的制備、抗炎活性與作用、配方篩選研究，初步的志 愿者試驗含服試驗可達到治愈慢性咽炎的效果。

研發(fā)階段/n本發(fā)明涉及一種制備甲殼素脫乙酰酶的方法，該方法用短柄梨孢帚霉（Scopulariopsisbrevicaulis）作甲殼素脫乙酰酶產(chǎn)生菌，經(jīng)活化后將其接入到含有發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵容器中，使其在pH值為6.5-7.0之間，溫度在27-29oC、轉(zhuǎn)速200-240rpm的搖床上發(fā)酵90-100小時，發(fā)酵液經(jīng)分離、鹽析、純化得甲殼素脫乙酰酶產(chǎn)品。利用本發(fā)明的方法制備的甲殼素脫乙酰酶每ml發(fā)酵液的活力單位最高可達36U。

可以量產(chǎn)/n針對當前工業(yè)發(fā)展對脂肪酶的大量需求與脂肪酶實際表達水平較低 的技術(shù)瓶頸，突破了脂肪酶超高效表達技術(shù)關(guān)鍵，建立了真菌脂肪酶高 效表達技術(shù)平臺，構(gòu)建的疏棉狀嗜熱絲孢菌脂肪酶(Thermomyces lanuginosus lipase,TLL)基因工程菌 10L 發(fā)酵，酶活力可達 64,000 U/ml 以上，達到世界報道的最高水平。產(chǎn)品可用于生物能源，制革，油脂水 解、轉(zhuǎn)酯、酯化，再生紙脫墨等廣泛用途。建設(shè)其發(fā)酵生產(chǎn)線預(yù)計需要 800-1000 萬元，經(jīng)濟效益可觀。針對當前工業(yè)發(fā)展對脂肪酶

本發(fā)明提供的一種使植鞣革柔軟的酶處理方法是在轉(zhuǎn)鼓中，先將植鞣革浸泡于自身重量100～300％的酸溶液中，于30～60℃下轉(zhuǎn)動酸化處理至少10min，并使體系的pH穩(wěn)定在3～4.5內(nèi)，然后在植鞣革的酸化液中以植鞣革重量計加入10～200u/g的酶制劑軟化處理至少0.5h，并控制酶處理廢液中羥脯氨酸含量不高于20mg/L，軟化完畢進行水洗，水洗后按輕革加工的常規(guī)工藝進行后續(xù)處理。本發(fā)明由于在酶處理前對植鞣革進行了酸化處理，因而使后續(xù)加入的酶制劑的活力得以保持，使處理后的植鞣革的柔軟性和粒面平細性得到明顯提高，同時避免了過度處理而可能發(fā)生破壞植鞣革的現(xiàn)象，達到了將其用作鞋面革、服裝革、沙發(fā)革等輕革材料的要求。該方法操作簡便，易于推廣。

技術(shù)原理 ：顆粒高溫植酸酶制劑是一種新型的飼料添加劑 ,具有催化植酸 及植酸鹽水解成肌醇或磷酸鹽，提高飼料中有機磷的利用率，減少環(huán)境的磷 污染和解除植酸的抗營養(yǎng)作用等功能，是一種高效環(huán)保型生物飼料添加劑。 技術(shù)原理主要通過強化酶和載體的多點結(jié)合， 使酶蛋白的構(gòu)象更加穩(wěn)定 .應(yīng)用 天然的多羥基化合物顆粒化材料還原末端含有許多的游離羥基， 結(jié)合酶蛋白 分子側(cè)鏈氨基酸殘基中的自由氨基提高酶結(jié)構(gòu)的剛性和熱穩(wěn)定性

磷脂酶 D 是一種用于磷脂改性的工業(yè)化生產(chǎn)用酶，近年來研究較多且效果比較明顯的是通過微生物發(fā)酵的方法獲得磷脂酶 D。磷脂酶 D 主要用于兩個方面：一是從卵磷脂出發(fā)，通過磷酸基轉(zhuǎn)移反應(yīng)，制備含量較少的磷脂化合物，如磷脂酰絲氨酸（PS）、磷脂酰肌醇（PI）等；二是通過轉(zhuǎn)移反應(yīng)合成新的磷脂衍生物，用在藥物學(xué)領(lǐng)域。磷脂酰絲氨酸是磷脂中的一種，天然含量稀少，但它是大腦中主要的酸性磷脂，能控制和調(diào)節(jié)細胞膜關(guān)鍵蛋白的功能狀態(tài)，提高腦細胞的活力，改善大腦功能、修復(fù)大腦損傷，成為“腦專一性營養(yǎng)物質(zhì)”。本項目通過菌種篩選獲得一株高產(chǎn)磷脂酶 D 的肉桂鏈霉菌菌株。通過發(fā)酵優(yōu)化，發(fā)酵酶活可達到 10U/mL 以上，可用于 PS、PI 的生產(chǎn)。