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本發(fā)明涉及基因檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，公開了DLGAP5、CDK1、SKA3、KIF4A、BUB1、TPX2、NCAPG、HMMR和TOP2A的基因組合在制備用于前列腺癌干性分型的檢測(cè)試劑盒中的應(yīng)用。還公開了一種用于前列腺癌干性分型檢測(cè)的試劑盒，包括檢測(cè)DLGAP5、CDK1、SKA3、KIF4A、BUB1、TPX2、NCAPG、HMMR、TOP2A的上、下游引物序列。本發(fā)明的檢測(cè)試劑盒，能客觀、準(zhǔn)確、靈敏地對(duì)前列腺癌進(jìn)行干性分型，協(xié)助前列腺癌患者選擇敏感治療方法，從而有助于提高患者預(yù)后。

本課題研發(fā)用于海洋環(huán)境（海水及水產(chǎn)品）中病毒、致病菌等病原微生物、重點(diǎn)針對(duì)可能引起人類疾病的細(xì)菌和病毒（如總桿菌數(shù)、大腸桿菌、糞鏈球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、銅綠假單孢菌、金黃色葡萄球菌、腺病毒、腸道病毒、甲肝病毒、副溶血弧菌、創(chuàng)傷弧菌、沙門氏菌及李斯特菌）快速檢測(cè)的分子生物技術(shù)，為研制用于這些微生物的現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)測(cè)手段和設(shè)備奠定理論和技術(shù)基礎(chǔ)。檢測(cè)方法采用基因芯片檢測(cè)、蛋白質(zhì)檢測(cè)和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）檢測(cè)三種。

本發(fā)明涉及一種微流控芯片制作技術(shù)，主要用于高分子聚合物材質(zhì)微流控芯片制作，其特征在于利用CNC雕刻機(jī)直接加工微流控設(shè)備，即利用數(shù)控軟件進(jìn)行微流控芯片的通道設(shè)計(jì)，得到相應(yīng)的雕刻路徑，編寫雕刻用代碼；將雕刻代碼導(dǎo)入控制CNC雕刻機(jī)的軟件中，對(duì)要進(jìn)行制作的高分子聚合物材料進(jìn)行制作；圖案制作結(jié)束后，根據(jù)不同要求，封接芯片，即可得到功能化的微流控設(shè)備。 成果亮點(diǎn) 技術(shù)特點(diǎn)：極大的降低高分子聚合物微流控芯片的制作成本，簡(jiǎn)單易用，快速制備，有利于芯片的大批量生產(chǎn)，并能靈活的調(diào)節(jié)芯片微通道深度，有利于實(shí)現(xiàn)微流控芯片器件的功能多樣化，克服了現(xiàn)有技術(shù)制作微流控芯片設(shè)備成本高、制作效率低、難以實(shí)現(xiàn)芯片通道深度多樣化的缺點(diǎn)，排除了人為因操作熟練程度造成的偏差和人力的消耗。

本項(xiàng)目屬于腫瘤靶向藥物的體外藥敏檢測(cè)，是基于化學(xué)靶向藥與其靶蛋白在細(xì)胞死亡時(shí)也可結(jié)合的特性，設(shè)計(jì)并合成特異性發(fā)光基團(tuán)與靶向藥連接，得到一系列候選探針，經(jīng)細(xì)胞篩選、裸鼠荷瘤切片共定位、人源病理樣本孵育驗(yàn)證，篩選獲得靶向藥探針。將探針與患者活檢樣本共孵育后，通過檢測(cè)其熒光分布及強(qiáng)度即可直接得知患者對(duì)該靶向藥的敏感程度，從而給予患者更加精準(zhǔn)的給藥建議。該技術(shù)檢測(cè)耗時(shí)短、結(jié)果準(zhǔn)確、方法便捷、易于推廣，能夠與基于大數(shù)據(jù)的基因檢測(cè)技術(shù)形成很好的互補(bǔ)融合，幫助臨床醫(yī)生為患者制定出更加精準(zhǔn)的診療方案。 技術(shù)創(chuàng)新點(diǎn)： 該探針能夠?qū)崿F(xiàn)將靶向藥與患者活檢樣本的結(jié)合情況進(jìn)行原位顯色并相對(duì)定量，其熒光的分布及強(qiáng)度直接提示患者對(duì)該靶向藥的敏感程度，目前國(guó)內(nèi)尚無其他技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)。該技術(shù)能夠彌補(bǔ)基因檢測(cè)只能從基因水平間接預(yù)測(cè)藥物敏感度的不足，給出的結(jié)果更為準(zhǔn)確和個(gè)性化。目前我們已合成并檢測(cè)了包括 3 種肺癌靶向藥探針在內(nèi)的 6種探針，項(xiàng)目一期預(yù)計(jì)合成國(guó)內(nèi)已上市的 6 種肺癌化學(xué)靶向藥的全部探針。 市場(chǎng)應(yīng)用前景： 近年來精準(zhǔn)醫(yī)療行業(yè)的發(fā)展愈發(fā)蓬勃，2016 年其國(guó)內(nèi)市場(chǎng)估值已達(dá)百億。精準(zhǔn)醫(yī)療大致分為精準(zhǔn)診斷和精準(zhǔn)治療兩大板塊，目前精準(zhǔn)診斷一般依靠間接法或直接法。間接法主要通過基因及表觀遺傳學(xué)檢測(cè)和大數(shù)據(jù)分析，對(duì)同一亞型的患者給出相同的診療方案，其準(zhǔn)確性強(qiáng)烈依賴于基因檢測(cè)的準(zhǔn)確性及大數(shù)據(jù)庫(kù)的完善程度。一代 Sanger測(cè)序雖成本較低易于普及，但只能檢測(cè)單基因突變，且靈敏度較低、檢測(cè)耗時(shí)長(zhǎng)、工作量大，無法滿足龐大的測(cè)序需求；二代測(cè)序 NGS 具有通量高、敏感度強(qiáng)、能夠獲得未知突變信息等優(yōu)勢(shì)，但其儀器和試劑要求極高價(jià)格昂貴，且能夠準(zhǔn)確解讀數(shù)據(jù)的科研人員十分稀缺。同時(shí)，基因檢測(cè)不能檢出基因表達(dá)過程中旁路對(duì)于待測(cè)基因表達(dá)的影響，將直接導(dǎo)致給藥建議有誤差。直接法主要是腫瘤藥敏技術(shù)，如 MTT比色法、ATP 熒光檢測(cè)法等，需要依托原代腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，該技術(shù)由于巨大的個(gè)體化差異，成功率很不穩(wěn)定，使得該類技術(shù)普及困難。 基于以上情況，開發(fā)一種更加精準(zhǔn)敏銳且操作便捷、易于推廣的腫瘤精準(zhǔn)給藥篩查技術(shù)，是十分有必要的。該技術(shù)能夠與現(xiàn)有的精準(zhǔn)診斷技術(shù)形成強(qiáng)有力的互補(bǔ)，能夠幫助臨床醫(yī)生更好地為患者制定治療方案，為患者爭(zhēng)取更大的生存機(jī)會(huì)，為國(guó)內(nèi)精準(zhǔn)醫(yī)療行業(yè)的發(fā)展提供一個(gè)全新的思路。 合作方式： 融資共同開發(fā)，優(yōu)先與第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行合作。鑒于技術(shù)保密性，暫未申請(qǐng)專利。

本項(xiàng)目核心技術(shù)是耐高壓分子篩膜，利用天然氣自身高壓優(yōu)勢(shì)，以天然氣采出壓力和管道輸送壓力之差作為膜分離推動(dòng)力，在極少能耗下完成天然氣純化目的。已完成中試制備，主要分離性能指標(biāo)和能耗指標(biāo)都明顯優(yōu)于現(xiàn)有的分離技術(shù)。 專利情況：在申請(qǐng)13項(xiàng)；已授權(quán)10項(xiàng)， 成熟度：研制 創(chuàng)新要點(diǎn)：1）對(duì)稱大孔單管支撐體：膜管長(zhǎng)50 cm，分子篩膜應(yīng)用于4 Mpa高壓下、CO2/CH4（50/50 mol%）混合氣體的CO2滲透速率>0.6x10-7 mol/(m2sPa)和CO2/CH4分離選擇性>50。 2）非對(duì)稱單管支撐體：膜管長(zhǎng)50 cm，分子篩膜應(yīng)用于4 Mpa高壓下、CO2/CH4（50/50 mol%）混合氣體的CO2滲透速率>1.8x10-7 mol/(m2sPa)和CO2/CH4分離選擇性>50。

本發(fā)明公開了蛋白質(zhì)nog1在調(diào)控植物產(chǎn)量和/或穗粒數(shù)中的應(yīng)用。所述蛋白質(zhì)nog1為氨基酸序列是序列表中序列2所示的蛋白質(zhì)；所述產(chǎn)量為單株產(chǎn)量；所述穗粒數(shù)為主莖穗粒數(shù)。實(shí)驗(yàn)證明，向Guichao 2中導(dǎo)入抑制所述蛋白質(zhì)nog1表達(dá)的物質(zhì)，得到轉(zhuǎn)基因植物乙；與Guichao 2相比，轉(zhuǎn)基因植物乙的單株產(chǎn)量減少和/或主莖穗粒數(shù)減少。將編碼蛋白質(zhì)nog1的核酸分子導(dǎo)入SIL176中，得到轉(zhuǎn)基因植物甲；與SIL176相比，轉(zhuǎn)基因植物甲的單株產(chǎn)量增加和/或主莖穗粒數(shù)增加。因此，蛋白質(zhì)nog1對(duì)調(diào)控水稻產(chǎn)量和穗粒數(shù)具有非常重要的作用。

南開大學(xué)劉陽研究員與天津醫(yī)科大學(xué)康春生教授合作在國(guó)際知名學(xué)術(shù)期刊NanoLetters（DOI:10.1021/acs.nanolett.8b03644）上發(fā)表文章，提出了一種新型的納米復(fù)合材料（NC-KLVFF），可有效清除Aβ毒性寡聚體，并減輕Aβ誘導(dǎo)的AD小鼠的神經(jīng)毒性。該納米復(fù)合材料為表面集成有Aβ捕捉肽（KLVFF）的小粒徑納米顆粒（圖2b，14±4nm）。這種納米復(fù)合材料將KLVFF通過原位聚合交聯(lián)在血清蛋白質(zhì)分子表面（圖2a），與Aβ共培養(yǎng)可顯著改變Aβ寡聚體的形貌，進(jìn)而形成Aβ/NC-KLVFF納米團(tuán)簇而不是Aβ寡聚體。隨著病理性Aβ寡聚體的減少，納米復(fù)合材料減輕了Aβ誘導(dǎo)的神經(jīng)元損傷，并恢復(fù)了腦內(nèi)小膠質(zhì)細(xì)胞吞噬Aβ的能力，最終保護(hù)了海馬神經(jīng)元免受凋亡。研究人員考察了NC-KLVFF在減輕神經(jīng)毒性和促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞清除方面的作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明NC-KLVFF通過與Aβ作用形成納米團(tuán)簇體，顯著減輕了Aβ對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞膜的黏附，進(jìn)而減小了對(duì)神經(jīng)元的損傷（圖3a,b）。在小膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)Aβ的吞噬實(shí)驗(yàn)中，也觀察到Aβ/NC-KLVFF納米團(tuán)簇體展現(xiàn)出更易被內(nèi)在化的特點(diǎn)（圖3c,e）。

一種杜仲eu-Hmgr蛋白編碼序列，屬于基因工程領(lǐng)域。所分離出的DNA分子包括：編碼具有杜仲eu-Hmgr蛋白活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列與SEQ ID NO.3中從核苷酸第170-1952位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在40-55℃條件下與SEQ ID NO.3中從核苷酸第170-1952位的核苷酸序列雜交。本發(fā)明是一種3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A的還原酶，有助于提高杜仲中次生代謝產(chǎn)物或其前體的含量，次生代謝產(chǎn)物具有雙向調(diào)節(jié)人體血壓的作用，并可降低人體膽固醇含量，預(yù)防心腦血管硬化等功能。對(duì)于保護(hù)人民的健康生長(zhǎng)有所幫助。

本發(fā)明公開了一種斜生纖孔菌鯊烯合酶基因及其編碼的蛋白質(zhì)與用途，本發(fā)明所提供的鯊烯合酶基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或者添加、取代、插入或缺失一個(gè)或多個(gè)核苷酸的同源序列或其等位基因及其衍生的核苷酸序列。所示基因編碼的蛋白質(zhì)具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列或者添加、取代、插入或缺失一個(gè)或多個(gè)氨基酸的同源序列。本發(fā)明提供的鯊烯合酶基因可以通過基因工程技術(shù)提高斜生纖孔菌中樺褐孔菌醇的含量，可用于利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)來提高斜生纖孔菌中樺褐孔菌醇含量的研究和產(chǎn)業(yè)化中。而這些次生代謝產(chǎn)物在臨床上具有抗腫瘤、防治艾滋病等潛在的應(yīng)用價(jià)值，對(duì)保護(hù)人民的健康生長(zhǎng)有所幫助。因而本發(fā)明具有很大的應(yīng)用前景。

本發(fā)明公開了一種蝶蛹金小蜂毒液絲氨酸蛋白酶抑制劑Pp-PI多肽，其具有SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列。本發(fā)明還同時(shí)公開了編碼上述蝶蛹金小蜂毒液絲氨酸蛋白酶抑制劑Pp-PI多肽的基因，其具有SEQ ID NO：1中第126-290位的核苷酸序列；或者與SEQ IDNO：1中從核苷酸第126-290位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者其核苷酸序列能在40-55℃條件下與SEQ ID NO：1中從核苷酸第126-290位的核苷酸序列雜交。上述蝶蛹金小蜂毒液絲氨酸蛋白酶抑制劑Pp-PI多肽能用于制備蝶蛹金小蜂毒液絲氨酸蛋白酶抑制劑，用于轉(zhuǎn)基因作物或改造植物共生菌。