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本發(fā)明涉及納米顆粒技術(shù)領(lǐng)域，特別是一種蛋白?原花青素復(fù)合納米顆粒，以脯氨酸蛋白為載體，原花青素與脯氨酸蛋白通過自身的親和作用復(fù)合在一起，裝載率為33.5?62.3％，尺寸小于300nm，聚合物分散性指數(shù)小于0.3。制備方法在45?53℃條件下將脯氨酸蛋白溶液保溫攪拌，然后滴加相同體積的原花青素溶液，滴加完畢后在45?53℃條件下攪拌2?5h，冷卻至室溫，離心，洗滌、凍干。本發(fā)明的制備方法簡單可行，

本發(fā)明提供一種人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7突變蛋白，含有Arg198Ile/His200Phe的突變，具有SEQ ID NO.1的氨基酸序列。是從人結(jié)直腸癌細(xì)胞系SW480cDNA文庫中選出igfbp7基因編碼序列，然后構(gòu)建到原核表達(dá)載體pET28a質(zhì)粒中，使其能夠在大腸桿菌菌株BL21中表達(dá)IGFBP7蛋白。在該表達(dá)載體的基礎(chǔ)之上，構(gòu)建人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7突變蛋，轉(zhuǎn)化BL21后表達(dá)純化突變蛋白，指出IGFBP7與胰島素結(jié)合的關(guān)鍵位點。本發(fā)明提供的突變蛋白，制備方法步驟簡單可行且成功率較高，該蛋白與胰島素的結(jié)合能力有明顯降低，從而可以抑制胰島素抵抗，可在制備治療2型糖尿病藥物中應(yīng)用。

本技術(shù)首先根據(jù)鴨胸軟骨的化學(xué)組成設(shè)計了一種用于提取鴨硫 酸軟骨素的新型復(fù)合蛋白酶的基礎(chǔ)配方，并利用復(fù)配酶制備鴨硫酸軟骨素，其 工藝包括鴨胸軟骨骨粉的制備、鴨胸軟骨骨粉的酶解提取、蛋白質(zhì)的沉降、硫 酸軟骨素粉末四個步驟。本發(fā)明采用了復(fù)配酶解法提取鴨胸軟骨的硫酸軟骨素， 采用新型復(fù)合蛋白酶和胰蛋白酶復(fù)配，去掉了堿提這一步，在復(fù)配酶使用上也 進(jìn)行了優(yōu)化，其收率比其它方法提高了 20%左右，產(chǎn)品純度達(dá)到 90%~95%。用復(fù) 合酶代替稀堿或濃堿解離軟骨能夠大大降低對環(huán)境的污染，并且可以有效縮短 生產(chǎn)周期、降低生產(chǎn)成本、增加了產(chǎn)品收率、提高產(chǎn)品質(zhì)量，填補了該領(lǐng)域的 空白。 技術(shù)優(yōu)點或者效益預(yù)測:硫酸軟骨素(Chondroitinsulfate，CS)是 D-葡萄糖 醛酸和 N-乙酰氨基半乳糖以β-1,4-糖苷鍵連接而成的重復(fù)二糖單位組成的酸 性黏多糖。硫酸軟骨素具有抗凝血、抗炎癥、抗腫瘤、抗病毒、抗氧化、降血 脂、防止動脈粥樣硬化、調(diào)節(jié)體內(nèi)水分、清除自由基和延緩衰老等多種生理功 能，可應(yīng)用于食品、藥品、各種保健品及高檔化妝品中。我國是全球硫酸軟骨 素產(chǎn)量最大的國家，占全球產(chǎn)量的 80%以上，年平均產(chǎn)量多于 4000 噸；我國硫 酸軟骨素主要出口到美國、歐洲、日本等地，其中美國作為我國硫酸軟骨素第 一大出口市場，出口份額約占 50%。所以，隨著硫酸軟骨素生物活性功能不斷研 究及其應(yīng)用領(lǐng)域的不斷擴(kuò)展，硫酸軟骨素用途越來越廣，具有廣闊市場應(yīng)用前 景。

研究人員運用生物信息學(xué)分析疊加肝癌隊列標(biāo)本驗證證實CACYBP在肝癌組織中高表達(dá)，且高表達(dá)CACYBP的肝癌病人總生存時間及無疾病進(jìn)展時間更短，預(yù)后更差；而通過體外細(xì)胞實驗及小鼠模型發(fā)現(xiàn)缺失CACYBP的肝癌細(xì)胞株在體內(nèi)和體外的生長增殖能力顯著減弱。為了研究CACYBP調(diào)控肝癌生長的分子機(jī)制，研究人員利用串聯(lián)親和純化連用質(zhì)譜技術(shù)，首次鑒定出環(huán)指蛋白41（RNF41）與CACYBP相互作用，并通過泛素化實驗及放線菌酮追蹤檢測證實RNF41為CACYBP上游特異的E3泛素連接酶，在肝癌細(xì)胞中促進(jìn)CACYBP的降解，且兩者在肝癌組織中的表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，CACYBP促進(jìn)Ser10磷酸化使P27Kip1存留在胞漿中，從而加速細(xì)胞周期，促進(jìn)肝癌細(xì)胞生長增殖，而RNF41對這一過程具有抑制作用。       該研究結(jié)合生物信息學(xué)分析、肝癌隊列標(biāo)本、細(xì)胞功能及分子機(jī)制驗證，一方面揭示了CACYBP促進(jìn)肝癌生長增殖的上下游分子機(jī)制，另一方面為開發(fā)新型肝癌診療靶點提供了理論依據(jù)。

本發(fā)明涉及分子微生物學(xué)領(lǐng)域，具體的說是一種C型凝集素(C-type?lectin)及其制備和應(yīng)用。C型凝集素為序列表SEQ?ID?No.1中的氨基酸序列所示。制備方法：以許氏平鮋cDNA為模板PCR擴(kuò)增C型凝集素基因，構(gòu)建質(zhì)粒pLecC；將pLecC轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21Transetta(DE3)，對轉(zhuǎn)化子進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)后，收集上清，濃縮后即得重組C型凝集素。所述C型凝集素對多種弧菌具高效凝集作用，經(jīng)C型凝集素處理后的細(xì)菌對許氏平鮋的侵染能力顯著降低。因此，該C型凝集素有望應(yīng)用于魚類細(xì)菌性病害的防治。

骨素是從鯊魚魚翅骨中提取的。

海藻素是以泡葉藻、馬尾藻為原料，采用先進(jìn)的提取工藝精制而成，提取海藻中豐富的礦物質(zhì)及微量元素等成分，同時還含有一定數(shù)量的多酚化合物、海藻多糖和大量的生長調(diào)節(jié)因子，如細(xì)胞分裂素、生長素、赤霉素、甜菜堿、多胺等，極大的保留了純天然活性成分。這些純天然的活性成分，可刺激植物內(nèi)非特異性活性因子的產(chǎn)生和調(diào)節(jié)內(nèi)源激素的平衡，促進(jìn)植物的光合作用協(xié)調(diào)生長發(fā)育，提高其生命活力和對病、蟲、旱、澇、低溫等逆境的抗性。 海藻素屬于天然萃取物，無毒無害，無副作用的最佳植物營養(yǎng)食物，促進(jìn)種子萌芽和幼苗生長、提高作物產(chǎn)量、改善作物品質(zhì)、提高作物抗旱性、增效氮素等功效。可與其他肥料復(fù)配成新型的固體或液體肥，也可以通過海藻素中的多糖與農(nóng)藥（強(qiáng)堿性農(nóng)藥除外）形成復(fù)合體，是一種很好的農(nóng)藥稀釋增效劑，也顯著提高藥效并延長藥效期。 海藻素的五大特點  海藻素比傳統(tǒng)肥料營養(yǎng)全面，作物施用后生長均衡，增產(chǎn)效果顯著，且極少出現(xiàn)缺素癥。 海藻素以天然海藻為主要原料，含有大量從海藻中提取的有利于植物生長發(fā)育的天然生物活性物質(zhì)和海藻從海洋中吸收并富集在體內(nèi)的礦物質(zhì)營養(yǎng)元素，包括海藻多糖、酚類多聚化合物、甘露醇、甜菜堿、植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)（細(xì)胞分裂素、赤霉素、生長素和脫落酸等）和氮、磷、鉀及鐵、硼、鉬、碘等微量元素。此外，為增加肥效和肥料的螯合作用，部分產(chǎn)品還溶入了適量的腐殖酸和適量微量元素，可滿足作物生長各階段對營養(yǎng)的需求。 海藻素中含有大量抗病因子及特殊成分，肥藥雙效。作物施用后抗逆抗病性顯著增強(qiáng)，葉面噴施可提高農(nóng)藥效果。  海藻素中含有的海藻多糖及低聚糖、甘露醇、酚類多聚化合物、甜菜堿、海藻酸及天然抗生素等物質(zhì)，具有顯著的抑菌抗病毒、驅(qū)蟲效果，真正起到肥藥作用，大幅增強(qiáng)作物的抗寒、抗旱、抗病、抗倒伏、抗鹽堿能力，對疫病、病毒病、炭疽、霜霉、灰霉、白粉病、枯萎病等產(chǎn)生較強(qiáng)的抗性。此外，海藻素中的海藻酸可以降低水的表面張力，在植物表面形成一層薄膜，增大接觸面積，使水溶性物質(zhì)比較容易透過莖葉表面細(xì)胞膜進(jìn)入植物細(xì)胞，使植物最有效地吸收海藻提取液中的營養(yǎng)成分。如果把海藻素和殺蟲劑、殺菌劑混合使用，具有增效作用，可降低噴灑費用。  海藻素中含有大量的高活性成分，植物易吸收。作物施用后長勢旺盛，可明顯提高產(chǎn)量及作物的品質(zhì)。  海藻中所特有的海藻多糖、海藻酸、高度不飽和脂肪酸等物質(zhì)，具有很高的生物活性，可刺激植物體內(nèi)非特異性活性因子的產(chǎn)生。同時，海藻素中還含有天然植物生長調(diào)節(jié)劑，如：生長素、細(xì)胞分裂素類物質(zhì)和赤霉素等，其比例與陸生植物中各激素比例相近，具有很好調(diào)節(jié)內(nèi)源激素平衡的作用。作物施用后，產(chǎn)量及品質(zhì)明顯提高，葉菜類增產(chǎn)20%以上，糧食作物增產(chǎn)15%以上，果樹增產(chǎn)10%～30%，同時使一級果的數(shù)量增加到80%以上，能明顯提高煙草、棉花、花卉等經(jīng)濟(jì)作物品質(zhì)，尤其是對大棚蔬菜作物，增產(chǎn)增值效果十分顯著。  海藻素含有豐富的有機(jī)質(zhì)及緩釋因子，肥效長，可改善土壤微生態(tài)、活土促根及抗重茬。  海藻素可直接使土壤或通過植物使土壤增加有機(jī)質(zhì)，激活土壤中的各種有益微生物。這些微生物可在植物、微生物代謝循環(huán)中起著催化劑的作用，使土壤的生物效力增加。植物和土壤微生物的代謝物可為植物提供更多的養(yǎng)分。同時，海藻多糖形成的螯合系統(tǒng)可以使?fàn)I養(yǎng)緩慢釋放，延長肥效。另外，它含有的天然化合物如海藻酸鈉是天然土壤調(diào)理劑，能促進(jìn)土壤團(tuán)粒結(jié)構(gòu)的形成，改善土壤內(nèi)部孔隙空間，協(xié)調(diào)土壤中固、液、氣三者比例，恢復(fù)由于土壤負(fù)擔(dān)過重和化學(xué)污染而失去的天然膠質(zhì)平衡，增加土壤生物活力，促進(jìn)速效養(yǎng)分的釋放，有利于根系生長，提高作物的抗逆性及抗重茬能力。 海藻素天然安全無公害。  傳統(tǒng)的化學(xué)肥料肥效單一、污染嚴(yán)重，長期使用會導(dǎo)致土壤結(jié)構(gòu)被破壞。海藻素屬天然海藻提取物，與陸生植物有良好的親和性，對人、畜無毒無害，對環(huán)境無污染，具有其他任何化學(xué)肥料都無法比擬的優(yōu)點，在國外被列入有機(jī)食品專用肥料。海藻素聚合了海洋中多種活性物質(zhì)，具備營養(yǎng)全面、抗病增產(chǎn)、活土、無公害等許多優(yōu)點，是真正符合現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展方向的好肥料。

蛋白

組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶（EZH2）因其功能異常導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生發(fā)展而成為極具潛力的腫瘤治療靶點。目前EZH2抑制劑僅抑制自身甲基轉(zhuǎn)移酶活性，無力應(yīng)對其非催化功能驅(qū)動的致癌活性。研發(fā)靶向EZH2的蛋白質(zhì)水解靶向嵌合體(PROTAC)分子以及分子膠，以實現(xiàn)EZH2的致癌活性的完全阻斷并克服當(dāng)前雙功能嵌合型蛋白降解藥物成藥性不佳的問題。 基于前期發(fā)現(xiàn)的EZH2降解劑的基礎(chǔ)，通過進(jìn)一步結(jié)構(gòu)優(yōu)化，發(fā)現(xiàn)具有良好EZH2 降解活性的PROTAC分子E7、E13和分子膠水ED6Y。其中E13是當(dāng)前分子量最小的EZH2靶向的PROTAC降解分子，并展現(xiàn)了良好的成藥性；ED6Y是機(jī)制新穎的EZH2單價降解劑。在神經(jīng)母細(xì)胞瘤、前列腺癌以及急性髓系白血病等惡性腫瘤中，EZH2可通過非甲基轉(zhuǎn)移酶活性，持續(xù)激活癌基因活性。E7、E13和ED6Y通過誘導(dǎo)EZH2蛋白降解實現(xiàn)完全抑制EZH2致癌活性，在臨床前藥效學(xué)研究中展現(xiàn)了優(yōu)越的抗腫瘤效果，并可誘導(dǎo)腫瘤免疫原性。EZH2蛋白降解藥物為EZH2依賴性腫瘤治療方法提供了新的策略。 EZH2降解藥物的市場前景廣闊，以神經(jīng)母細(xì)胞瘤為例，惡性程度高、疾病進(jìn)展迅猛且治療難度大，在兒童惡性腫瘤中約占8%至10%，死亡率15%。GD2單抗作為過去數(shù)十年唯一被批準(zhǔn)上市的用于神經(jīng)母細(xì)胞瘤的新藥，共有三款產(chǎn)品獲批上市，目前并沒有小分子化學(xué)藥物獲批上市。本項成果的成功將為以神經(jīng)母細(xì)胞瘤為代表的EZH2活化的腫瘤提供新穎的治療策略，將帶來良好的經(jīng)濟(jì)社會效益。

? 大蒜素軟膠囊和大蒜素片的藥理作用很廣：1）抗菌作用：大蒜素對葡萄球菌、腦膜炎雙球菌、肺炎雙球菌、鏈球菌、白喉桿菌、痢疾桿菌、大腸桿菌、傷寒桿菌、副傷寒桿菌、結(jié)核桿菌、霍亂弧菌等均有明顯的抑致或殺滅作用。2）對心血管的作用：大蒜素對飼膽固醇引起家兔高膽固醇血癥，高血液凝固性和主動脈脂質(zhì)沉積具有保護(hù)作用。并有降低血膽固醇、三酸甘油酯和脂蛋白的作用。3）抗癌和提高免疫力作用：對肺部和消化道的霉菌感染有抑制作用，大蒜與腫瘤抽出物相混時，瘤組織發(fā)育受阻。大蒜中還含有激發(fā)人體巨噬細(xì)胞吞噬力的有效成