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目前，沙門菌的檢測主要還是采用傳統(tǒng)的細菌學(xué)方法，通過前增菌、選擇性增菌、分離培養(yǎng)、生化試驗以及血清學(xué)鑒定的步驟一步一步進行檢測，工作量大且耗時長。PCR及Real Time PCR等分子生物學(xué)技術(shù)雖然具有快速、簡便等大量優(yōu)點，卻較少應(yīng)用，主要原因是以DNA為模版的PCR及Real Time PCR技術(shù)并不能區(qū)分細菌的死活細胞，樣品中存在的死細胞可能導(dǎo)致假陽性結(jié)果。本課題將EMA對死活細胞的鑒別作用與Real Time PCR的靈敏度、特異性相結(jié)合，有效克服了DNA分子檢測手段不能鑒別死活細胞的弊端，在實現(xiàn)檢測的快速、簡便的同時大大提高了結(jié)果的準(zhǔn)確性。確證了EMA-Real Time PCR可實現(xiàn)實際樣品中沙門菌活細胞的快速測定，可將EMA-Real Time PCR推廣到實際檢測工作中，如此便可大大縮短檢測所需的時間，節(jié)省大量的人力、物力。研究成果具有重大的應(yīng)用前景。 社會效益：EMA-Real Time PCR可用于實際樣品中沙門菌活細胞的快速檢測，建立一種快速檢測病原菌的新方法體系，用于實際的檢測工作中，如此不僅可以減少食品安全日常監(jiān)測的工作量，更重要的是，在突發(fā)性食物中毒事件中，大大縮短了病原菌檢測所需時間，提高了反應(yīng)效率，為突發(fā)性公共衛(wèi)生事件的解決提供更好的技術(shù)平臺。

我公司曾先后聯(lián)合山東省農(nóng)科院、魯東大學(xué)等共同研究開發(fā)“野生雞油菌馴化養(yǎng)殖關(guān)鍵技術(shù)”，每年都進行野生雞油菌的采集、分離提純等工作，但至今未馴化養(yǎng)殖成功。尋求產(chǎn)學(xué)研合作伙伴，共同研發(fā)野生雞油菌分離提純方法和防止雜菌感染的關(guān)鍵技術(shù)，實現(xiàn)野生雞油菌工廠化規(guī)模養(yǎng)殖

成果與項目的背景及主要用途： 間二甲苯經(jīng)一硝化可制得 2,4-二甲基硝基苯和 2,6-二甲基硝基苯，再經(jīng)還原 可分別得到 2,4-二甲基苯胺和 2,6-二甲基苯胺，廣泛應(yīng)用于染料、醫(yī)藥、橡膠助 劑及塑料等領(lǐng)域，是重要的有機中間體之一。目前的混酸常規(guī)硝化法，反應(yīng)溫度 低，耗水、耗能大，反應(yīng)時間長，過程不易控制，廢酸難處理。因此開發(fā)先進的 間二甲苯一硝化方法很重要。 本工藝首次采用間二甲苯絕熱硝化制得硝基間二甲苯。絕熱硝化反應(yīng)開始后， 利用自己反應(yīng)放出的熱來提高物料的反應(yīng)溫度。雖然混酸濃度不斷降低，但由于 反應(yīng)溫度的提高，因此仍能使混酸具有足夠的硝化能力，從而保證了反應(yīng)速度。 該法比常規(guī)混酸硝化優(yōu)點多，如反應(yīng)溫度高，無需冷卻水，耗能小，反應(yīng)時間僅 為半小時，設(shè)備生產(chǎn)能力比常規(guī)硝化法提高至少 2 倍。所用設(shè)備僅為常規(guī)的硝化 及分離設(shè)備，無需特殊加工。硝化后廢酸可經(jīng)閃蒸后全部回用，減少了環(huán)境污染。 技術(shù)原理與工藝流程簡介： 間二甲苯與混酸經(jīng)良好攪拌混合后，快速絕熱升溫進行硝化反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束 后硝化分離得硝基物和高溫廢酸。硝基物供進一步還原，可以制備其它有機物或 中間體。高溫廢酸經(jīng)閃蒸提濃可回收再利用。 技術(shù)水平及專利與獲獎情況： 已完成成熟小試工藝，國內(nèi)外技術(shù)領(lǐng)先。本技術(shù)可降低能耗 50～60％，收率 提高 5～10％，硝基物收率可大于 95%，二硝基物小于 6000ppm，原料消耗定額 降低 5～10％，設(shè)備生產(chǎn)能力提高約 2 倍。 應(yīng)用前景分析及效益預(yù)測： 絕熱硝化法不僅可服了常規(guī)硝化法的諸多不足，而且具有許多新優(yōu)點。用本 技術(shù)生產(chǎn)一硝基間二甲苯，可使成本下降約 10％。按年產(chǎn) 600 噸計，可比常規(guī) 法凈增利潤 200 多萬元。并可回收利用廢酸，解決廢酸污染問題。 應(yīng)用領(lǐng)域：有機中間體。 技術(shù)轉(zhuǎn)化條件（包括：原料、設(shè)備、廠房面積的要求及投資規(guī)模）： 25天津大學(xué)科技成果選編 生產(chǎn)規(guī)模及產(chǎn)量：600 噸/年。 所需廠房面積：300m2。 主要設(shè)備：硝化鍋、硝化分離器、硫酸高位槽、硝酸高位槽、混酸高位槽、 混酸配制罐、稀堿配制罐、稀堿高位槽、水洗及分離器、堿洗及分離器、閃蒸器、 真空泵。 主要原材料及來源：間二甲苯、硫酸、燒堿、硝酸，國內(nèi)均有現(xiàn)貨供應(yīng)。 設(shè)備投資：110 萬元。 合作方式及條件：面議。 

間二甲苯經(jīng)一硝化可制得2,4-二甲基硝基苯和2,6-二甲基硝基苯，再經(jīng)還原可分別得到2,4-二甲基苯胺和2,6-二甲基苯胺，廣泛應(yīng)用于染料、醫(yī)藥、橡膠助劑及塑料等領(lǐng)域，是重要的有機中間體之一。目前的混酸常規(guī)硝化法，反應(yīng)溫度低，耗水、耗能大，反應(yīng)時間長，過程不易控制，廢酸難處理。因此開發(fā)先進的間二甲苯一硝化方法很重要。本工藝首次采用間二甲苯絕熱硝化制得硝基間二甲苯。絕熱硝化反應(yīng)開始后，利用自己反應(yīng)放出的熱來提高物料的反應(yīng)溫度。雖然混酸濃度不斷降低，但由于反應(yīng)溫度的提高，因此仍能使混酸具有足夠的硝化能力，從而保證了反應(yīng)速度。該法比常規(guī)混酸硝化優(yōu)點多，如反應(yīng)溫度高，無需冷卻水，耗能小，反應(yīng)時間僅為半小時，設(shè)備生產(chǎn)能力比常規(guī)硝化法提高至少2倍。所用設(shè)備僅為常規(guī)的硝化及分離設(shè)備，無需特殊加工。硝化后廢酸可經(jīng)閃蒸后全部回用，減少了環(huán)境污染。間二甲苯與混酸經(jīng)良好攪拌混合后，快速絕熱升溫進行硝化反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后硝化分離得硝基物和高溫廢酸。硝基物供進一步還原，可以制備其它有機物或中間體。高溫廢酸經(jīng)閃蒸提濃可回收再利用。

該技術(shù)是以苯酐、硫-硝混酸為原料，在催化劑作用下選擇性硝化生產(chǎn) 3-硝基鄰苯二甲酸。在不高于 1000C 條件下苯酐轉(zhuǎn)化率大于 95%， 3-硝基鄰苯二甲酸選擇性大于 98%。催化劑可以多次循環(huán)使用，成本低廉。

本發(fā)明涉及一種利用噬菌體PhiX174的E基因和葡萄球菌核酸酶A基因轉(zhuǎn)化制備鴨疫里默氏菌前菌影疫苗的方法與應(yīng)用方法。該方案首先將噬菌體PhiX174的E基因和葡萄球菌核酸酶A基因通過柔性連接臂(Gly4Ser)3連接成串聯(lián)基因，并進一步構(gòu)建溫控表達載體pBV-E-SN。將pBV-E-SN電擊轉(zhuǎn)化進入鴨疫里默氏菌原生質(zhì)體，篩選陽性克隆28℃增菌培養(yǎng)。分離菌體加保護劑后分裝、冷凍干燥。本發(fā)明所制備的活菌疫苗經(jīng)飲水免疫，既可以刺激呼吸道和消化道黏膜的局部免疫，也可以激發(fā)體液免疫。

MicroRNA (miRNA) 是一種新型的腫瘤標(biāo)志物，定量檢測血液中的miRNA的表達水平，可 以為腫瘤早期診斷、預(yù)后判斷以及藥物選擇、療效檢測提供寶貴的參考信息。 本項目以血液中miRNA的高靈敏檢測為目標(biāo)，建立不同亞群miRNA (包括囊泡包裹形式、 蛋白復(fù)合體形式等) 提取、富集純化技術(shù)，結(jié)合納米技術(shù)、酶催化及生物分子工程技術(shù)，建立 了多種高靈敏檢測miRNA新方法，為腫瘤早期診斷提供一種敏感、特異、簡單的非損傷性技 術(shù)手段。 本項目的實施能夠形成可推廣應(yīng)用的血液中miRNA高靈敏檢測試劑盒，應(yīng)用于腫瘤早期 診斷的實用技術(shù)。開發(fā)這一技術(shù)將可檢出早期癌癥，使全國每年近百萬的癌癥患者提高存活 率，有顯著的社會效益及經(jīng)濟效益。

本實用新型提供一種用于外泌體分離、富集和檢測的微流體芯片，包括底板、頂板以及位于所述底板和頂板之間的檢測板，所述檢測板內(nèi)設(shè)有液體檢測腔，所述液體檢測腔能夠?qū)⒛蛞褐械耐饷隗w收集于其中，并達到檢測的要求。本實用新型通過芯片收集后利用ELISA檢測方法進行檢測，可用于檢測尿液樣本或膀胱癌細胞系培養(yǎng)液上清中外泌體的含量，具有高度特異性的特點。本實用新型對排出人體之外的尿液進行收集，不會對人體造成任何影響或創(chuàng)傷，也不需要昂貴且精密的實驗儀器（如超速離心機、熒光顯微鏡），具有很大的應(yīng)用前景。

本成果在常溫常壓條件下實現(xiàn)金屬的浸提和富集，無需消耗強酸和雙氧水等危險化學(xué)品，設(shè)備無需過度防腐，無需龐大的酸霧處理系統(tǒng)，設(shè)備投入低、運行安全。該技術(shù)屬平臺技術(shù)，對于各種材料源危廢（廢舊電池、失效催化劑、電子線路板）和工業(yè)源危廢（電鍍污泥、酸洗污泥、冶煉廢渣）均可實現(xiàn)金屬浸提和富集。 一、項目分類 關(guān)鍵核心技術(shù)突破 二、技術(shù)分析 基于膜生物反應(yīng)器的生物瀝浸和循環(huán)富集成套設(shè)備，大幅提高了微生物濃度，較之常規(guī)的生物冶金/生物瀝浸其效率提高了一個數(shù)量級，浸提時間由5-10天縮短至6-24小時。通過專利技術(shù)-膜生物反應(yīng)器實現(xiàn)了瀝液的再生循環(huán)和金屬的循環(huán)富集，不但解決了危廢中金屬含量低、回收困難的問題；而且顯著減少了廢水的產(chǎn)生和培養(yǎng)液的消耗。該技術(shù)在常溫常壓條件下實現(xiàn)金屬的浸提和富集，無需消耗強酸和雙氧水等危險化學(xué)品，設(shè)備無需過度防腐，無需龐大的酸霧處理系統(tǒng)，設(shè)備投入低、運行安全。該技術(shù)屬平臺技術(shù)，對于各種材料源危廢（廢舊電池、失效催化劑、電子線路板）和工業(yè)源危廢（電鍍污泥、酸洗污泥、冶煉廢渣）均可實現(xiàn)金屬浸提和富集。該技術(shù)尤其對于火法和濕法過程產(chǎn)生的低含量煙灰、爐灰、浸出渣都具有很強的適用性、高效性和經(jīng)濟性，可同步實現(xiàn)有價金屬最大程度回收和殘渣脫毒脫帽。 每處理一噸涉重危廢的經(jīng)濟收益為3000元，成本約為1000元，同時節(jié)省了4000元每噸的涉重危廢處置費用，如果每年處理3000噸涉重危廢，毛收益為800萬，可節(jié)約處置費1200萬。 從涉重危廢中回收有價金屬，去除有毒金屬，使涉重危廢脫毒脫帽，不僅避免了金屬資源的浪費，也避免了重金屬的環(huán)境污染。 基于膜生物反應(yīng)器的生物瀝浸和循環(huán)富集成套設(shè)備，大幅提高了微生物濃度，較之常規(guī)的生物冶金/生物瀝浸其效率提高了一個數(shù)量級，浸提時間由5-10天縮短至6-24小時。通過專利技術(shù)-膜生物反應(yīng)器實現(xiàn)了瀝液的再生循環(huán)和金屬的循環(huán)富集，不但解決了危廢中金屬含量低、回收困難的問題；而且顯著減少了廢水的產(chǎn)生和培養(yǎng)液的消耗。該技術(shù)在常溫常壓條件下實現(xiàn)金屬的浸提和富集，無需消耗強酸和雙氧水等危險化學(xué)品，設(shè)備無需過度防腐，無需龐大的酸霧處理系統(tǒng)，設(shè)備投入低、運行安全。

本發(fā)明公開了一種基于廣義中國余數(shù)定理的兩圖像置亂隱藏及恢復(fù)的方法。本發(fā)明對圖像尺寸相同的兩幅圖像，首先基于預(yù)設(shè)的一組兩兩互質(zhì)的素數(shù)分別取模后得到兩組子圖像，再從中隨機選取部分子圖對進行對應(yīng)位置的像素部分互換，得到置亂隱藏后的兩組子圖像，實現(xiàn)對原圖像對的同時加密。恢復(fù)處理時，首先基于置亂隱藏處理時所設(shè)置的一組兩兩互質(zhì)的素數(shù)，從給定的兩組子圖像中準(zhǔn)確恢復(fù)出所有無序的像素對，然后根據(jù)圖像的特征，將得到的像素對中的無序像素對準(zhǔn)確地分為兩類，基于分類結(jié)果，無損地恢復(fù)出原來的兩幅圖像，實現(xiàn)圖像對的加密傳輸交互。