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本發(fā)明提供了一種痕量?jī)?nèi)毒素的快速檢測(cè)方法，可直接靈敏高通量地檢測(cè)多種樣品中痕量?jī)?nèi)毒素，并提供相應(yīng)的試劑盒，該試劑盒人工抗體的 96 孔酶標(biāo)板、內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品溶液、兔抗內(nèi)毒素多克隆抗體(一抗)、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗兔抗體(二抗)和化學(xué)發(fā)光試劑組成。該方法將集特異性樣品預(yù)處理和 ELISA 檢測(cè)于一體，人工抗體耐高溫、酸堿和有機(jī)溶劑，可高效特異性分離和富集樣品中的痕量?jī)?nèi)毒素，ELISA 則可特異快速地檢測(cè)所富集的內(nèi)毒素，結(jié)合高靈敏度的化學(xué)發(fā)光法，有效提高 ELISA 檢測(cè)內(nèi)毒素的靈敏度、準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性

已有樣品/n該產(chǎn)品通過(guò)了高低溫、 高溫高濕、 震動(dòng)沖擊、 放電試驗(yàn)、 電磁兼容、 軟件測(cè)評(píng)、技術(shù)指標(biāo)檢驗(yàn)等第三方測(cè)試， 在可檢測(cè)爆炸物種類、 探測(cè)靈敏度、 檢測(cè)時(shí)間以及準(zhǔn)確性方面已達(dá)到或超過(guò)國(guó)外進(jìn)口同類產(chǎn)品先進(jìn)水平， 而且設(shè)備使用耗材少、 價(jià)格低，在核心技術(shù)上具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)

超高純氨是LED行業(yè)、微電子行業(yè)中重要的原料氣體，主要應(yīng)用于金屬有機(jī)化學(xué)淀積法(MOCVD)制造外延芯片或氮化硅薄膜。過(guò)量的水分會(huì)嚴(yán)重影響工藝產(chǎn)率和產(chǎn)品質(zhì)量。氨氣中痕量水分析是氣體分析領(lǐng)域的難點(diǎn)之一，目前國(guó)內(nèi)外可以穩(wěn)定、準(zhǔn)確測(cè)量超高純氨氣中痕量水的方法只有光腔衰蕩法、紅外光譜吸收法和熱分解露點(diǎn)法。國(guó)標(biāo)中已將熱分解露點(diǎn)法列為檢測(cè)高純氨氣中痕量水分的方法，但國(guó)內(nèi)目前采用該種測(cè)定方法的單位為零，而且對(duì)熱分解露點(diǎn)法的研究也鮮有報(bào)道。本技術(shù)主要通過(guò)改進(jìn)熱分解露點(diǎn)法可以穩(wěn)定、準(zhǔn)確、快速的測(cè)量超高純氨氣中痕量水分。本技術(shù)主要設(shè)計(jì)、制作出氣密性良好的超高純氨進(jìn)樣器、氨分解反應(yīng)槽、熱分解露點(diǎn)裝置。制作了氨分解催化劑d并考察了分解槽溫度、氣體流速對(duì)所選用的四種氨分解催化劑在測(cè)試中的水分基線的影響及分解槽溫度、氣體流量對(duì)氨分解率的影響，篩選出最適合的氨分解催化劑d用以測(cè)量超高純氨中痕量水。采用熱分解露點(diǎn)裝置分析高純氮?dú)庵泻哿克⒊呒儼睔庵泻哿克?，并用配有氦離子放電檢測(cè)器的氣相色譜檢測(cè)超高純氨中的痕量氧，折算出超高純氨中痕量水。與光腔衰蕩法、紅外吸收光譜法測(cè)試結(jié)果的比對(duì)分析證明熱分解露點(diǎn)法測(cè)試值準(zhǔn)確度較高，成本低，可用以分析超高純氨氣中痕量水分，最低檢測(cè)限約80ppb?？疾榱税狈纸鉁囟?、氣體流量對(duì)高純氨中痕量水分析的影響，從而確定熱分解露點(diǎn)裝置最佳工作條件?？疾榱俗儔褐脫Q、變流置換對(duì)縮短測(cè)試時(shí)間的影響，采用新的置換方式的測(cè)試時(shí)間是只平速吹掃所用時(shí)間的一半。比對(duì)了不同冷源的精密露點(diǎn)儀通過(guò)熱分解露點(diǎn)裝置測(cè)試高純氮?dú)狻⒏呒儦錃狻⒊呒儼睔獾臋z測(cè)限，制冷機(jī)為冷源的精密露點(diǎn)儀檢測(cè)限最低。

本研究利用人工合成的免疫抗原，經(jīng)動(dòng)物免疫后獲得特異性好的多克隆抗體，建立了 MC-LR 高靈敏間接競(jìng)爭(zhēng) ELISA 檢測(cè)方法，經(jīng)和國(guó)外進(jìn)口的同類產(chǎn)品比較，在很多關(guān)鍵指標(biāo)上已經(jīng)達(dá)到或超過(guò)進(jìn)口產(chǎn)品。該藻毒素快速檢測(cè)技術(shù)和檢測(cè)產(chǎn)品，靈敏度較高，特異性好，制備簡(jiǎn)單，成本低廉，適合規(guī)?；噭┖械纳a(chǎn)。 創(chuàng)新要點(diǎn) （1）性能指標(biāo)達(dá)到國(guó)際先進(jìn)水平。經(jīng)第三方專業(yè)權(quán)威機(jī)構(gòu)或部門的驗(yàn)證（附件 11），最低能檢測(cè)出 0.05ng/ml 的 MC-LR 含量，本項(xiàng)目產(chǎn)品技術(shù)含量高，操作簡(jiǎn)便快捷，結(jié)果靈敏準(zhǔn)確，檢測(cè)成本低廉

本發(fā)明涉及一種新的免疫毒素，其特征在于利用人源性毒素穿孔素（Perforin）的活性片斷作為毒素分子，通過(guò)基因工程技術(shù)將毒素分子與載體分子的基因重組在大腸桿菌中表達(dá)出的免疫毒素，其優(yōu)點(diǎn)是對(duì)人體不具有免疫原性，有嚴(yán)格靶向性，可直接激發(fā)細(xì)胞損傷過(guò)程，殺滅靶細(xì)胞，不需要內(nèi)化及細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程，可用于治療某些腫瘤和自身免疫性疾病。特別是適合于抑制器官移植時(shí)的免疫排斥

研發(fā)階段/n內(nèi)容簡(jiǎn)介：應(yīng)用現(xiàn)代酶化工高新技術(shù)，將魔芋精粉中的葡甘聚糖深度開(kāi)發(fā)成一種新型生物殺菌劑（類毒素）。本產(chǎn)品獲得一項(xiàng)專利，專利號(hào)：ZL0015970.4。該產(chǎn)品為魔芋葡甘聚糖（其分子量為2000以下）的改良產(chǎn)物，屬弱堿性水溶性抗菌劑，是一種廣譜性抗真菌病毒的半合成生物農(nóng)藥，可造成病原菌細(xì)胞畸變，產(chǎn)生大量泡狀物，細(xì)胞壁斷裂，菌體崩潰。對(duì)病原菌孢子萌發(fā)有很強(qiáng)的抑制作用，還有交叉保護(hù)和誘導(dǎo)抗性的功能。同時(shí)具有增強(qiáng)免疫的藥效特征，國(guó)內(nèi)外尚無(wú)這方面的報(bào)道。藥效試驗(yàn)證實(shí)，類毒素對(duì)各種類型的果蔬病害，特別是

研發(fā)階段/n真菌毒素是由產(chǎn)毒真菌產(chǎn)生的有毒次生代謝產(chǎn)物，是常見(jiàn)的致癌物質(zhì)。污染食品后，容易出現(xiàn)急性和慢性毒性。為此，世界上幾乎所有的國(guó)家和地區(qū)都規(guī)定了黃曲霉毒素等真菌毒素在食品及飼料中的最大允許含量并作為強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。目前，真菌毒素的檢測(cè)方法都需要使用昂貴、劇毒的真菌毒素標(biāo)準(zhǔn)品。多檢測(cè)人員對(duì)經(jīng)常接觸劇毒的真菌毒素標(biāo)準(zhǔn)品有很強(qiáng)的心理戒備，而昂貴的標(biāo)準(zhǔn)品也致使真菌毒素的檢測(cè)費(fèi)用偏高。技術(shù)水平：真菌毒素的快速檢測(cè)技術(shù)以抗獨(dú)特型抗體（一種蛋白質(zhì)）作為真菌毒素的代用品，從而使檢測(cè)過(guò)程中無(wú)需使用真菌毒素標(biāo)準(zhǔn)品

已有樣品/n本項(xiàng)目團(tuán)隊(duì)經(jīng)過(guò)數(shù)年科技攻關(guān)， 發(fā)明了等離子體源離子遷移譜檢測(cè)技術(shù)， 自主研制的非放射源離子遷移譜檢測(cè)儀器， 已通過(guò)了電磁、 高低溫、 高溫高濕、 震動(dòng)沖擊、 軟件評(píng)估、 性能等第三方嚴(yán)格測(cè)試。 探測(cè)炸藥種類、 靈敏度、 檢測(cè)時(shí)間以及準(zhǔn)確性等技術(shù)指標(biāo)， 達(dá)到或超過(guò)歐美同類產(chǎn)品先進(jìn)水平， 并且設(shè)備使用耗材價(jià)格低廉。痕量爆炸物離子遷移譜檢測(cè)儀， 適用于機(jī)場(chǎng)、 軌道交通、 地鐵、 車站、 碼頭、 郵政和海關(guān)等安檢部門使用。

研發(fā)有效的內(nèi)毒素 LPS 脫毒方法具有重要意義，本項(xiàng)目一方面通過(guò) KDO 定量方法檢測(cè)對(duì) LPS 分子的吸附能力，從發(fā)酵食品中篩選到 LPS 吸附能力最強(qiáng)酵母菌株 CSW。證實(shí) LPS 與 Y. lipolytica 細(xì)胞共存一段時(shí)間后，會(huì)產(chǎn)生 LPS 含量降低的現(xiàn)象。通過(guò) 18s r DNA 分析，菌株 CSW1 與 1.0 mg/m L 來(lái)源于 E. coil O111:B4的 LPS 共存后，可使 LPS 水平降低約 70%，而 S. cerevisiae BY4742 僅使 LPS含量近 30%。 另外一方面，過(guò)敲除大腸桿菌 E. coli 染色體基因上與 LPS 合成相關(guān)基因，構(gòu)建了多株能夠直接合成新型特殊結(jié)構(gòu) Kdo2-lipid A 的突變菌株，具有低內(nèi)毒素，適合用于大腸桿菌表達(dá)宿主生產(chǎn)各種蛋白及氨基酸。 關(guān)鍵技術(shù) 脂多糖 LPS 是存在于大多數(shù)革蘭氏陰性菌外膜的主要組成部分，可通過(guò)激活宿主細(xì)胞內(nèi) TLR4 受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑等，促進(jìn)炎性細(xì)胞分泌多種細(xì)胞因子，進(jìn)而引發(fā)強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)，造成疾病或者死亡，在食品和藥品中是重要的毒力因子，因此研發(fā)有效的 LPS 脫毒方法具有重要意義。本成果獲得了食品級(jí)的 LPS 脫毒菌株，具有應(yīng)用前景。工業(yè)發(fā)酵中大腸桿菌野生型菌株中內(nèi)毒素釋放，是導(dǎo)致熱原污染的重要原因，這增加了分離純化成本，本成果從源頭改造獲得低毒性的大腸桿菌平臺(tái)菌株，避免了發(fā)酵工程中熱原產(chǎn)生

【申 請(qǐng) 號(hào)】CN201220282951.9 【發(fā) 明 人】彭國(guó)平；李紅陽(yáng)；鄭云楓 【摘要】 本實(shí)用新型公開(kāi)了一種內(nèi)毒素檢測(cè)系統(tǒng)，屬于內(nèi)毒素監(jiān)控領(lǐng)域。該系統(tǒng)是在常規(guī)激光粒徑檢測(cè)儀的基礎(chǔ)上對(duì)光路檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行集成，采用雙激光源照射，輸出光通過(guò)光路進(jìn)入檢測(cè)池后由多點(diǎn)散射光接收器接收，再通過(guò)光電轉(zhuǎn)換及信號(hào)放大處理后進(jìn)入定量運(yùn)算器，定量運(yùn)算器計(jì)算出內(nèi)毒素濃度并顯示，若內(nèi)毒素濃度超過(guò)限值則觸發(fā)預(yù)警系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)在線監(jiān)控。本實(shí)用新型可實(shí)現(xiàn)內(nèi)毒素的定量檢測(cè)，檢測(cè)靈敏度高，不消耗試劑，對(duì)藥液無(wú)污染，檢測(cè)時(shí)間短，可靠性高。