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昆蟲病原線蟲是韭蛆等蔬菜有害昆蟲的天敵，本項目的針對性：韭菜存在的韭蛆危害. 大棚蔬菜根部及葉面蟲害防治.城市樹木鉆蛀型害蟲的防治.中草藥根部蟲害的防治.高爾夫球場草坪草根部蟲害防治。 韭蛆取食韭菜根部是韭菜的主要害蟲， 因防治韭蛆大量使用農藥造成韭菜農藥殘留超標嚴重危害人民身體健康。 項目進展：已完成固體和液體方法培養并生產昆蟲病原線蟲及其儲藏的技

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（一）蠟樣芽孢桿菌蠟樣芽孢桿菌NJYH63305是團隊自行篩選的有益芽孢桿菌，廣泛應用于農業、醫藥、食品保健、飼料等領域。在農業領域，是一種集抑菌、殺蟲、促生于一體的環境友好型高效生防制劑，對茶輪斑病菌、黃瓜枯萎病菌、立枯絲核菌、煙草赤星病菌、茶云紋葉枯病菌、小麥全蝕病菌、小麥紋枯病、尖鐮孢菌、鐮刀菌、終極腐霉菌等植物病害及小菜蛾具有較強抑制作用。在醫藥領域，可調節人體腸道微生態平衡，適于治療急慢性痢疾、腸炎、腹瀉、嬰幼兒腹瀉引起的腸功能紊亂等；在食品保健領域，可作為食品添加劑，長期服用能促進營養物質的消化吸收，減少腸道疾病的發生，提高免疫能力、增強抗病能力。 1、蠟樣芽孢桿菌國內外研究進展目前，國內外蠟狀芽孢桿菌研究大多處于實驗室內研究階段，其商品化并應用于農業防治的實例較少。國內市場上蠟樣芽孢桿菌農用制劑大部分為復配試劑，同時其大規模培養過程中也存在不少問題，如發酵放大過程信息采集困難、制劑有效期不長、產品貨架期短等，這些問題的深入研究對解決蠟樣芽孢桿菌高密度培養瓶頸、降低蠟樣芽孢桿菌生產成本、促進細胞大規模培養領域重大突破具有重要意義。2、本課題組技術優勢（1）團隊以項目為紐帶，建立了蠟樣芽孢桿菌在線監控的高密度培養與多階段發酵集成技術，在1000L發酵罐上蠟樣芽孢桿菌活菌數高達800億個/g, 比初始培養提高了230%，達國際領先水平；（2）篩選的芽孢保護劑，可提高蠟樣芽孢桿菌活性，延長半衰期40％以上；（3）協同江蘇省農科院及南京農業技術推廣站進行綠色防控技術推廣，于江蘇浦口林大蔬菜基地、江寧區湖熟街道設施蔬菜基地、溧水傅家邊茶廠等地建立2800畝示范區，重點試驗核心區460畝。推廣示范區內，蠟樣芽孢桿菌對水稻紋枯病、灰霉病、晚疫病等真菌病害抑制率達51.8％～85.9％，與蘇云金芽孢桿菌（Bt）進行增效試驗，小菜蛾殺滅率提高29%，降低化學農藥使用量50％以上，農藥殘留量低于國家無公害農產品標準；（4）目前已在國內外重要期刊發表學術論文10余篇，出版專著《高效有益微生態制劑開發與利用——蠟樣芽孢桿菌》，申請國家發明專利4項，授權3項，其中3項（ZL200910028025.1、ZL201010579133.0、ZL200910028320.7）在南京新百藥業有限公司成功實現轉化。（二）凝結芽孢桿菌團隊自行篩選獲得一株益生凝結芽胞桿菌NJYHHWG 877005，除具有和乳酸菌及雙歧桿菌同樣的保健功效外，還具有耐酸、耐熱、耐鹽、容易培養和保存的特點。凝結芽孢桿菌為兼性厭氧菌，進入腸道后會消耗游離氧，有利于厭氧微生物乳酸菌和雙歧桿菌的生長，多用于調節腸道內微生態菌群平衡，團隊自主知識產權的凝結芽胞桿菌NJYHHWG 877005對甜瓜枯萎病菌、番茄早疫病菌、西瓜炭疽病菌等有很強的防治效果，可進行新型高效生物農藥的開發。

當今世界，傳染病形勢日益嚴峻，為了實現傳染病的現場快速診斷，本項目開發了一種基于封閉試卡盒的全自動便攜式病原體檢測系統，該系統以封閉式卡盒為核心，在系統外部移液、磁分離、熱循環等驅動下全自動地完成病原體核酸樣本提純和實時熒光PCR擴增檢測，在兩個小時內全自動地實現生物樣本輸入到檢測結果輸出整個過程。系統小巧便攜，操作簡便；封閉式卡盒的設計有效地避免了樣本間的交叉污染，使診斷結果更加穩定可靠。

原理：以蜜蜂為活體生物轉化器，利用體內酶系進行生物轉化，將果汁轉化為果蜜創新點：世界上首次提出“以飼代采”生物釀蜜概念，以大宗水果為原料，經前處理，飼喂蜜蜂，實現定場養蜂，實現蜂蜜工業化生產應用案例：2023年，在沈陽建立200群的生物釀蜜示范基地，輻射東北地區成果獲獎：第十五屆“挑戰杯”全國大學生課外科技活動大賽，三等獎成果評價：完全顛覆國內外幾千年的蜂蜜生產模式，實現0→1的突破，為蜂蜜生產打開一扇全新的大門，規避了傳統蜂蜜生產的限制因素以及不利因素，實現蜂蜜生產工業化、標準化、機械化、智能化，蜂蜜生產效率比傳統提高3-4倍，解決了水果滯銷、儲運損失的問題。

城市黑臭水體給群眾帶來極差的感官體驗，嚴重影響城市形象。城市黑臭河道的治理工作已得到政府部門高度重視（國務院“水十條”、住建部《城市黑臭水體整治工作指南》）。 城市黑臭水體一般位于老居民區、早期拆遷安居房等區域，雨污分流、 污水收集等擴建改造工程難度和政府財政資金壓力較大。 項目所開發的微生物治理技術，3-5 天即可消除河道黑臭現象，逐步凈 化水體，恢復河道健康狀態。使用時，只需向黑臭水體直接潑灑微生態制劑即可，無需曝氣、無需種植水生植物或者放養螺螄、魚類等水生動物。該技術已在多地進行實地應用，水質數據符合住建部要求，治理效果令人滿意。治理成本下降至 30 元/m3水體?年以下。 

成果介紹成果采用磁珠法核酸提取對目標病原體核酸進行提取純化，核酸提取過程采用液體轉移的方式，主要包括裂解、結合、清洗、洗脫四個步驟，純化后的核酸被自動轉移至擴增檢測區進行實時熒光定量PCR步驟，根據熒光曲線，判斷檢測結果。產品近似立方體，長寬高約為30cm，系統整體質量約為15Kg，主要包括封閉式卡盒、一體化檢測裝置和配套的PC端控制軟件三部分結構。系統主要功能為全自動磁珠法核酸提取和多重實時熒光PCR擴增檢測，經優化后可在1小時內完成“樣本輸入—結果輸出”全過程，最多可進行6重檢測。檢測過程全封閉全自動，在卡盒中完成，避免了交叉污染。技術創新點及參數該成果提供一種病原體現場快速檢測系統兩層結構，上層結構包含上層底板，水平軸控制組件和豎直軸控制組件，下層結構包含下層底板，磁分離組件和熱組件，熒光檢測組件。配合封閉式病原體檢測卡盒，卡盒固定安裝在系統中，通過PC端設計的軟件控制系統對卡盒中液體的操作，可自動完成基于磁珠法的病原體快速熒光檢測。整個系統操作簡單，安全，并且檢測結果以報告的形式直觀展現。市場前景本產品樣機在江蘇疾控中心和浙江疾控中心進行過多種臨床樣本檢測試驗，檢測樣本種類有：糞便、唾液、腦脊液等，檢測病原體種類有：腺病毒、艱難梭菌、大腸桿菌等。同一樣本，使用本系統檢測結果與手工核酸提取+商用熒光定量PCR儀（Roche LightCycler96）檢測結果相當（Ct值）。本產品正用于非典型性肺炎新冠病毒快速檢測研究。

針對我國蛋白飼料和多糖產品的巨大市場空間，團隊借助專有的合成生物學技術平臺自主研發了甲烷氣體高值化生物轉化技術，擁有我國行業內首個專利授權。利用該技術可以實現將頁巖氣、沼氣等甲烷氣體通過微生物高效轉化為細胞蛋白和多糖。 所產甲烷基細胞蛋白富含包括全部必需氨基酸的 18 種氨基酸，菌體粗蛋白含量大于 60%，其中 9 種必需氨基酸在總氨基酸中占比達 30%，其在總氨基酸含量、限制性氨基酸含量等參數水平上明顯優于豆粕蛋白，并與魚粉蛋白相似。 所產多糖經權威機構鑒定，其結構與保濕霜類護膚品添加劑海藻多糖結構相似度達97%，具有保濕、修復等功能，目前主要應用于醫美產品添加劑與化妝品添加劑。 本項目具有生產成本低、制備工藝簡潔高效和制備過程環保無污染的優勢。通過前期建立甲烷生物制造的全鏈條研發平臺，該技術已完成從實驗室向產業化的推進。

該成果獲 2013 年度教育部科學技術進步獎一等獎， 2017 年國家科技進步二等獎。成果探明了我國食源性彎曲菌、沙門菌、單核細胞增生李斯特菌和副溶血性弧菌在全產業鏈的定量流行病學新特征，創建了其快速定性、定量檢測新技術，菌種庫和分子溯源數據庫以及定量風險評估體系，建立了風險預測模型和軟件，定量評估了雞肉彎曲菌污染對我國人群的健康風險；創制了新型消毒制劑、有機酸和低溫控制技術和新型系列防控疫苗等病原菌干預技術，形成了覆蓋產業鏈全程的食源性病原菌集成防控技術體系，實現了傳播和風險的有效防控。

本項目提供了一種從土壤中篩選出產脲酶菌株，該菌株能夠高效誘導鈣沉積，且產生的沉淀大多為方解石晶體，可作為生物粘結劑起到膠結和封堵的作用。可用于混凝土和磚石的表面和裂縫修復、地基加固、文物修復、邊坡防護及油田滲透性控制等諸多領域。