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涉及一種血管活性腸肽的融合蛋白，所述融合蛋白包含 1 個(gè)人血 清白蛋白(Albumin Human，HSA)和 1 個(gè)血管活性腸肽(vasoactive intestinal peptide，VIP),該融合蛋白所具有的獨(dú)特的氨基酸序列可以 保證其在宿主體內(nèi)高水平穩(wěn)定表達(dá)，在保留 VIP 原有功能的同時(shí)，體 內(nèi)半衰期顯著延長(zhǎng)。本發(fā)明同時(shí)提供該融合蛋白的制備方法及其在制 備抗炎、抗損傷、腦血管疾病、提高睡眠質(zhì)量的藥物中的應(yīng)用。

所述融合蛋白包 含 1 個(gè)人血清白蛋白（Albumin Human，HSA)和 1 個(gè)血管活性腸肽 （vasoactive intestinal peptide，VIP）,該融合蛋白所具有的獨(dú)特的氨基酸序列可以保證其在宿主體內(nèi)高水平穩(wěn)定表達(dá)，在保留 VIP 原有功能的同時(shí)，體內(nèi)半衰期顯著延長(zhǎng)。

本品治療骨質(zhì)疏松的療效比國(guó)內(nèi)外的鈣制劑，活性VD及降鈣素藥物在提高骨密度（BMD）與骨礦含量（BMC）上占優(yōu)勢(shì)，可補(bǔ)充因年齡增長(zhǎng)而喪失的骨基質(zhì)的有機(jī)成分，恢復(fù)有機(jī)成分與無機(jī)成分二者的平衡，促進(jìn)骨膠原纖維與羥基磷灰石的結(jié)合，使骨堅(jiān)硬而富有彈性，增加或維持骨量，因而減少骨折的發(fā)生，緩解骨質(zhì)疏松而引起的骨痛，總有效率達(dá)90%。緩解因缺鈣而造成的小腿肌肉痙攣，總有效率達(dá)92%。

本發(fā)明涉及納米顆粒技術(shù)領(lǐng)域，特別是一種蛋白?原花青素復(fù)合納米顆粒，以脯氨酸蛋白為載體，原花青素與脯氨酸蛋白通過自身的親和作用復(fù)合在一起，裝載率為33.5?62.3％，尺寸小于300nm，聚合物分散性指數(shù)小于0.3。制備方法在45?53℃條件下將脯氨酸蛋白溶液保溫?cái)嚢瑁缓蟮渭酉嗤w積的原花青素溶液，滴加完畢后在45?53℃條件下攪拌2?5h，冷卻至室溫，離心，洗滌、凍干。本發(fā)明的制備方法簡(jiǎn)單可行，

研究?jī)?nèi)容 ：本研究采用復(fù)合酶法水解蠶蛹蛋白制備免疫調(diào)節(jié)活性多 肽，得到最佳的水解工藝條件。在最佳水解條件下，酶解后蛋白質(zhì)得率為 57.24%，小分子多肽得率為 32.16%。該結(jié)果達(dá)到了計(jì)劃指標(biāo)，即蛋白質(zhì) 得率>40%，小分子多肽得率 >20%。另外，本研究探討了水解條件與分子 量大小，分子量大小與免疫調(diào)節(jié)活性的關(guān)系，同時(shí)建立了毛細(xì)管凝膠電泳 測(cè)定蠶蛹多肽分子的檢測(cè)方法。 技術(shù)特點(diǎn) ：本研究

項(xiàng)目的背景及主要用途： 真菌疏水蛋白是由絲狀真菌在生長(zhǎng)的特定時(shí)期分泌的一類具有特殊理化性質(zhì)的分泌型的小分子量、疏水性蛋白質(zhì)，它們可以通過自我裝配在兩相界面形成兩親性蛋白膜，改變介質(zhì)表面的親水性和疏水性，是已知表面活性最高的蛋白之一，有著很高的理論價(jià)值和應(yīng)用價(jià)值。 真菌疏水蛋白是純天然生物提取制品，無毒害，無污染；耐酸堿，抗相變能力強(qiáng)。自我裝配形成有活性的蛋白膜，具有良好的熱穩(wěn)定性和透氣不透水性。由于它的特性，使得它具有眾多優(yōu)點(diǎn)：（1）自

項(xiàng)目研究背景 ：乳鐵蛋白是轉(zhuǎn)鐵蛋白家族中的成員之一，在人和哺乳 動(dòng)物的乳汁中含量較豐富，其中，牛常乳中含量為 0.02～0.35mg/mL。乳 鐵蛋白因其晶體呈紅色，又稱 “紅蛋白 ”，具有多種生理功能，乳鐵蛋白大 多從牛乳加工奶酪時(shí)的副產(chǎn)物乳清中提取加工而成。當(dāng)前，我國(guó)在干酪發(fā) 展過程中面臨的很大問題是乳清的利用。隨著乳品工業(yè)的發(fā)展，乳清大量 增加，這將成為乳鐵蛋白的一個(gè)重要來源，本項(xiàng)目以牛常乳為原料

可用于制備抗炎、抗損傷、腦血管疾病、提高睡眠質(zhì)量的藥物， 該融合蛋白所具有的獨(dú)特的氨基酸序列可以保證其在宿主體內(nèi)高水 平穩(wěn)定表達(dá)，在保留 VIP 原有功能的同時(shí)，體內(nèi)半衰期顯著延長(zhǎng)。

惡性腫瘤是嚴(yán)重危害人類健康的一類疾病，盡管自1942年耶魯大學(xué)的Gilman等首次證明鹽酸氮芥對(duì)小鼠Gardner淋巴瘤有治療作用以來，腫瘤的藥物治療取得了長(zhǎng)足的進(jìn)展，并成為當(dāng)前臨床治療不可或缺的主要措施。但高毒副作用、耐藥等問題仍然是臨床腫瘤藥物治療遇到的主要障礙。新的作用靶點(diǎn)和作用機(jī)制的創(chuàng)新抗腫瘤藥物的研發(fā)是改變腫瘤治療現(xiàn)狀的重要途徑，也是新世紀(jì)抗腫瘤藥物研究的主導(dǎo)方向。 根據(jù)前期合成構(gòu)效關(guān)系的研究基礎(chǔ)上，對(duì)靶點(diǎn)Pim蛋白激酶進(jìn)行合理藥物設(shè)計(jì)。結(jié)合Pim-1蛋白晶體結(jié)構(gòu)的對(duì)接研究，構(gòu)建新的類似化合庫(kù)。通過對(duì)候選化合物庫(kù)進(jìn)行虛擬篩選和系統(tǒng)地體外酶水平和細(xì)胞水平實(shí)驗(yàn)，進(jìn)一步研究構(gòu)效關(guān)系，提煉3D藥效團(tuán)。對(duì)篩選出的1-2個(gè)成藥性高的化合物進(jìn)行激酶選擇性研究和體內(nèi)抗腫瘤藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)，為一類基于新靶點(diǎn)藥物研發(fā)提供重要依據(jù)。 通過研究建立一套快速、有效針對(duì)Pim激酶的藥效團(tuán)模擬，虛擬篩選的組合化學(xué)方法學(xué)。通過系統(tǒng)研究候選化合物結(jié)構(gòu)、分子量大小、成藥性和功能基等因素與細(xì)胞、酶抑制能力以及毒性大小等的關(guān)系，篩選出一批低毒、低成本、高效的pim激酶抑制劑，用于腫瘤模型的綜合考察。為進(jìn)一步開發(fā)具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的針對(duì)抗腫瘤藥物，奠定良好的應(yīng)用基礎(chǔ)。在已建立小鼠腫瘤模型上，綜合考察Pim激酶抑制劑在體內(nèi)對(duì)腫瘤的治療效果。為Pim激酶在動(dòng)物體內(nèi)的新功能探討提供更多的理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 通過本項(xiàng)目的實(shí)施，將獲合成50個(gè)以上TZD類似物，經(jīng)過體外和體內(nèi)篩選，爭(zhēng)取獲得 1-2個(gè)結(jié)構(gòu)新穎、具有高活性，毒副作用較低的抗腫瘤藥物的候選化合物。通過探討噻唑二酮類化合物結(jié)構(gòu)與激酶選擇性的關(guān)系，以及通過腫瘤動(dòng)物模型的研究，進(jìn)一步豐富Pim激酶的新功能及通過新的信號(hào)通路調(diào)控腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)抑制凋亡的研究?jī)?nèi)容。