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【申 請(qǐng) 號(hào)】CN201310739917.9 【發(fā) 明 人】曹園；段金廒；吳永平；姚毅 【摘要】 本發(fā)明公開了一個(gè)具有抗真菌活性的新化合物Ⅱ。本發(fā)明通過對(duì)墊狀卷柏化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)深入研究，經(jīng)過波譜和質(zhì)譜數(shù)據(jù)分析表明從墊狀卷柏中分離得到新化合物Ⅱ。體外抗真菌活性研究表明，本發(fā)明提供的化合物Ⅱ?qū)Χ喾N致病真菌，包括白色念珠菌、熏煙色曲霉、紅色毛癬菌、須癬毛癬菌等具有明顯的抑制作用，并且毒性低，臨床用藥安全，有望開發(fā)成為新的抗真菌藥物。

本發(fā)明提出一種秸稈還田纖維分解性生防真菌及菌劑和應(yīng)用，其中該菌株F7JX993849的分類命名為綠木霉Trichoderma?virens，保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，其保藏編號(hào)為CGMCC?No.3.17613。本發(fā)明的綠木霉Trichoderma?virens?F7JX993849對(duì)農(nóng)作物秸稈中的纖維素、半纖維素和果膠組分同時(shí)具有較強(qiáng)的分解能力。其次，本發(fā)明的綠木霉Trichoderma?virens?F7JX993849可以拮抗植物病源菌入侵，具有生物防治功能。再次，本發(fā)明的秸稈還田纖維分解性生防真菌所制成的菌劑，可以解決一般秸稈腐熟劑在應(yīng)用過程中效果不理想、不穩(wěn)定的問題，具有良好的應(yīng)用價(jià)值。

本發(fā)明涉及一種海帶內(nèi)生真菌及其在制備生物活性提取物方面的應(yīng)用，所述海帶內(nèi)生真菌的菌種保藏信息為：保藏單位名稱：中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心；保藏單位地址：北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所；保藏日期：2018年1月2日；保藏編號(hào)：CGMCC No.15181；分類命名：鏈格孢Alternaria sp.W-1。

本發(fā)明涉及一種海洋真菌發(fā)酵提取物及其作為抗老年癡呆藥物的應(yīng)用，所述提取物由如下步驟制備：(1)在無菌條件下，將海洋真菌Alternaria sp.W?1接種到PD液體培養(yǎng)基中，恒溫?fù)u床振蕩培養(yǎng)，溫度為25?30℃，搖床轉(zhuǎn)速為150?180r/min，培養(yǎng)時(shí)間為2?4d，得種子液；(2)將步驟(1)得到的種子液接種到察氏培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基pH為4.0?8.0，接種量為5?20％，培養(yǎng)溫度為22?34℃，培養(yǎng)時(shí)間為6?14d，得發(fā)酵物；(3)將步驟(2)得到的發(fā)酵物用3?5層無菌紗布過濾，得濾液，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮后，用乙酸乙酯萃取2?4次，合并有機(jī)相，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮即得所述提取物。

機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)高濃度優(yōu)選化合物MW5破壞真菌細(xì)胞膜并誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生ROS進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞死亡，低濃度MW5能破壞藥物外排泵MDR1功能，進(jìn)而增加氟康唑胞內(nèi)濃度進(jìn)而逆轉(zhuǎn)其耐藥性。

本研究的對(duì)象為來自海洋真菌代謝產(chǎn)物的命名為Xyloketals的系列化合物，其結(jié)構(gòu)新穎，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明 Xyloketal B有突出的防治動(dòng)脈粥樣硬化的作用，與陽(yáng)性藥辛伐他汀相比其作用更明顯，同時(shí)表明Xyloketal B 具有降壓、逆轉(zhuǎn)心肌肥厚的療效，在抗動(dòng)脈粥樣硬化作用的同時(shí)具有保護(hù)靶器官的作用，相對(duì)于目前臨床 用藥更有優(yōu)越之處。 在作用機(jī)制的研究中發(fā)現(xiàn)本化合物具有極強(qiáng)的抗氧化應(yīng)激、調(diào)控鈣內(nèi)流、促NO生成、保護(hù)血管內(nèi)皮 損傷和抗缺血缺氧特性。急性毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)xyloketal B毒性非常低，給小鼠單次口服、靜脈注射或腹腔 注射給藥，Xyloketal B的最大耐受劑量>1.4g/Kg(該劑量為降壓及抗心肌肥厚治療劑量的100倍)，極有可能發(fā) 要的作用。因此，防止血小板粘附聚集功能已經(jīng)成為防治動(dòng)脈粥樣硬化性疾病和血栓性疾病的重要靶標(biāo)之 展成為突出的防治心腦血管疾病的藥物。 一。三七屬于五加科植物，是我國(guó)一味傳統(tǒng)中藥。三七具有活血化瘀、消腫定痛的功能。研究已證實(shí)三七 皂苷是其發(fā)揮一系列功能的主要活性成分。我們本次研究成果發(fā)現(xiàn)，三七皂苷Rb2和Rd2可以抑制血小板 活化、粘附和聚集功能，

 AMF能與超過80%的陸生植物結(jié)合，是一類對(duì)植物生長(zhǎng)有促進(jìn)作用的有益真菌。大多數(shù)外來植物不僅能迅速地與入侵地AMF結(jié)合，而且能破壞本地植物與AMF共生關(guān)系。因此，AMF一直被認(rèn)為是促進(jìn)外來植物入侵的一個(gè)重要生物因子。然而，以往的研究表明AMF與植物的相互作用具有磷元素依賴性。低磷濃度時(shí)，AMF促進(jìn)植物生長(zhǎng)；而高磷濃度時(shí)，AMF抑制植物生長(zhǎng)。因此，磷濃度很可能是影響AMF對(duì)外來植物入侵促進(jìn)作用的重要因子。該研究通過對(duì)兩種華南入侵植物假臭草(Eupatorium catarium)和三葉鬼針草(Bidens pilosa)及其伴生的本地種進(jìn)行室內(nèi)控制實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)：隨著磷濃度增加，AMF對(duì)入侵植物和本地植物生長(zhǎng)作用都由促進(jìn)轉(zhuǎn)向抑制（圖a）?；旆N時(shí)，入侵植物抑制了本地植物與AMF結(jié)合，導(dǎo)致在低磷濃度時(shí)削弱了AMF對(duì)本地植物生長(zhǎng)的促進(jìn)作用；而在高磷濃度時(shí)削弱了AMF對(duì)本地植物生長(zhǎng)的抑制作用（圖b）。因此，AMF對(duì)外來植物入侵促進(jìn)的作用隨著磷濃度升高而減弱。       該研究首次提出并用實(shí)驗(yàn)證明AMF對(duì)外來植物入侵的促進(jìn)作用具有土壤磷濃度依賴性，完善了外來植物成功入侵的機(jī)制，提出了通過改變土壤微生物與外來植物共生關(guān)系來控制外來植物入侵的新思路。由于在全球氮沉降加劇的背景下會(huì)造成磷元素更為缺乏，該研究還預(yù)測(cè)未來AMF對(duì)外來植物入侵的促進(jìn)作用將會(huì)進(jìn)一步提升。

近日，植物保護(hù)學(xué)院小麥赤霉病防控研究團(tuán)隊(duì)在《NewPhytologist》期刊上在線發(fā)表了題為“Landscapeandregulationofalternativesplicingandalternativepolyadenylationinaplantpathogenicfungus”的研究論文。劉慧泉研究員為論文通訊作者，博士研究生路平為論文第一作者，該團(tuán)隊(duì)江聰研究員、王秦虎副教授和部分研究生也參與了該研究工作。

前期研究發(fā)現(xiàn)一個(gè)海洋真菌來源的，含有特殊的 N-甲基化和 D-型氨基酸片段的小分子活性環(huán)三肽化 合物 X-13，在動(dòng)物、模式生物和細(xì)胞水平均發(fā)現(xiàn)具有強(qiáng)烈的促血管生成作用；對(duì)大鼠糖尿病潰瘍損傷模 型也具有顯著修復(fù)活性。