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本發(fā)明公開了一對(duì)特異識(shí)別綿羊KRT25基因的多肽及其編碼基因和應(yīng)用。該多肽由多肽甲和多肽乙組成；所述多肽甲由16個(gè)TAL核酸識(shí)別單元組成，每個(gè)TAL核酸識(shí)別單元中具有一個(gè)雙連氨基酸；所述多肽乙由15個(gè)TAL核酸識(shí)別單元組成，每個(gè)TAL核酸識(shí)別單元中具有一個(gè)雙連氨基酸。本發(fā)明可實(shí)現(xiàn)在細(xì)胞或個(gè)體水平上對(duì)綿羊KRT25基因進(jìn)行敲除或修飾，以解析綿羊KRT25基因的功能、構(gòu)建綿羊KRT25基因突變庫(kù)或獲得相關(guān)疾病模型,為綿羊育種及醫(yī)藥研發(fā)服務(wù)。

成果與項(xiàng)目的背景及主要用途 一種在金屬催化下亞胺與一氧化碳共聚合成多肽類聚合物材料的新的、簡(jiǎn)捷的方法，不用氨基酸為原料，以廉價(jià)的亞胺和一氧化碳為單體，在金屬催化下發(fā)生交替共聚，直接生成多肽，從而使合成多肽的成本大大降低。這一途徑將可以避免繁雜的合成和活化氨基酸的步驟，使得多肽的合成和傳統(tǒng)的方法(如開環(huán)聚合反應(yīng)法)相比，被大大地簡(jiǎn)化。所得到的多肽類材料，在生物醫(yī)學(xué)材料和制藥等領(lǐng)域具有重要用途。 技術(shù)原理與工藝流程簡(jiǎn)介

本發(fā)明公開了一種MMP14雙靶點(diǎn)高效結(jié)合肽及多肽結(jié)構(gòu)序列的獲取方法和目標(biāo)物的用途。從MMP14蛋白誘導(dǎo)表達(dá)的人成骨肉瘤MG63細(xì)胞中篩選和獲得一組新型的雙靶點(diǎn)MMP14和Zn2+的多肽，包括：基于MG63細(xì)胞靶向誘導(dǎo)表達(dá)MMP14的噬菌體隨機(jī)十二肽庫(kù)體外消減篩選，經(jīng)3-5輪篩選，獲得富集的雙靶向MMP14和Zn2+的結(jié)合肽噬菌體和多肽結(jié)構(gòu)序列。目標(biāo)物作為先導(dǎo)分子用于疾病治療藥物研發(fā)和用于腫瘤診斷，還可用于蛋白質(zhì)分離純化、分子標(biāo)簽以及重金屬污染生物修復(fù)、采礦等。

一種在金屬催化下亞胺與一氧化碳共聚合成多肽類聚合物材料 的新的、簡(jiǎn)捷的方法，不用氨基酸為原料，以廉價(jià)的亞胺和一氧化碳 為單體，在金屬催化下發(fā)生交替共聚，直接生成多肽，從而使合成多 肽的成本大大降低。這一途徑將可以避免繁雜的合成和活化氨基酸的 步驟，使得多肽的合成和傳統(tǒng)的方法(如開環(huán)聚合反應(yīng)法)相比，被大 大地簡(jiǎn)化。所得到的多肽類材料，在生物醫(yī)學(xué)材料和制藥等領(lǐng)域具有 重要用途。 該方法是在高壓釜中，以 1，4-二氧六環(huán)為溶劑，在 800psi 壓力 的 CO、50℃油浴以及在催化劑作用下，亞胺與 CO 共聚得到產(chǎn)物多 肽。采用一種簡(jiǎn)單的金屬鈷化合物作催化劑，能有效地催化亞胺和一 氧化碳的交替共聚，得到高分子量和低分散度的多肽類聚合物。方法 簡(jiǎn)捷。 已取得的知識(shí)產(chǎn)權(quán)： 本項(xiàng)目得到國(guó)家自然科學(xué)基金資助，是一項(xiàng)具有原始創(chuàng)新性的科 研 成 果 ， 已 申 請(qǐng) 2 項(xiàng) 中 國(guó) 專 利 （ 申 請(qǐng) 號(hào) 200610129890.1 ， 200710195204.5）和國(guó)際專利（申請(qǐng)?zhí)?PCT/CN2007/003465），還將對(duì)后續(xù)發(fā)現(xiàn)及時(shí)申請(qǐng)專利保護(hù)，因此將擁有該技術(shù)的全部知識(shí)產(chǎn)權(quán)。成 果發(fā)表在化學(xué)刊物 Angew.Chem.，已受到學(xué)術(shù)界和一些國(guó)外公司的關(guān) 注。 應(yīng)用前景分析及效益預(yù)測(cè)： 應(yīng)用行業(yè)：生物醫(yī)學(xué)材料、制藥、功能材料。該項(xiàng)目所提供的新 型多肽類化合物，已經(jīng)能夠?yàn)樯镝t(yī)學(xué)工程領(lǐng)域提供一類新的重要的 可供選擇的材料。從長(zhǎng)遠(yuǎn)來看，開發(fā)出多個(gè)新的有效的催化劑體系， 實(shí)現(xiàn)更多類亞胺與一氧化碳的共聚，最終使該方法成為一種廣泛有效 的多肽的合成方法，將具有重大的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益。 應(yīng)用領(lǐng)域及能為產(chǎn)業(yè)解決的關(guān)鍵技術(shù)： 作為新的生物醫(yī)學(xué)材料可能具有更好的生物兼容性，因而代替現(xiàn) 有材料用于人工血管等方面。此外，還可被用作藥物的糖衣以及具有 藥物緩釋等功能。如能實(shí)現(xiàn)一般肽類的合成，其低廉的成本將有潛力 替代用任何其它合成方法得到的該類產(chǎn)品。不用氨基酸為原料，而是 以廉價(jià)的亞胺和一氧化碳為單體，從而使合成多肽的成本大大降低、 方法大大簡(jiǎn)化。 技術(shù)產(chǎn)業(yè)化條件： 投資規(guī)模約 500 萬元（不含基建投入）。

利用硅基單分子器件研究了分子馬達(dá)水解的動(dòng)力學(xué)過程，發(fā)現(xiàn)了無標(biāo)記的電學(xué)檢測(cè)方法觀察到的分子馬達(dá)的轉(zhuǎn)動(dòng)速度要比熒光標(biāo)記的方法快一個(gè)數(shù)量級(jí)（ACS Nano 2018, 11, 12789）以苯環(huán)為骨架、芴基為核心的共軛分子，并在末端修飾上氨基，通過穩(wěn)定的酰胺鍵將帶有羰基官能團(tuán)的功能分子連接在石墨烯電極之間，通過使用自主搭建的高速電學(xué)測(cè)試平臺(tái)對(duì)化學(xué)反應(yīng)進(jìn)行了實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。大的共軛結(jié)構(gòu)以及酰胺共價(jià)鍵的強(qiáng)耦合保證了分子具有良好的導(dǎo)電性；在化學(xué)反應(yīng)進(jìn)行的過程中，分子結(jié)構(gòu)的變化將導(dǎo)致分子軌道發(fā)生改變，從而影響導(dǎo)電通道，影響器件的電導(dǎo)特性。

研制了國(guó)際首例穩(wěn)定可逆的單分子光開關(guān)器件（ Science ,  2016 ,  352 , 1443;  J. Phys. Chem. Lett. ,  2017 ,  8 , 2849）；觀察到了低溫下聯(lián)苯基團(tuán)由于σ單鍵的旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的精細(xì)立體電子效應(yīng)（ Nano Lett. ,  2017 ,  17 , 856）；研究了分子間主客體相互作用的動(dòng)力學(xué)過程（ Sci. Adv .,  2016 ,  2 , e1601113），揭示了羰基和羥胺反應(yīng)形成酮肟的分子機(jī)制（ Sci. Adv. ,  2018 ,  4 , eaar2177），證實(shí)了利用單分子電學(xué)檢測(cè)方法研究單分子反應(yīng)動(dòng)力學(xué)的可行性，為實(shí)現(xiàn)單分子化學(xué)反應(yīng)的可視化研究邁出了重要的一步。他們利用硅基單分子器件實(shí)現(xiàn)了具有單堿基對(duì)分辨率的DNA雜交/脫雜交動(dòng)力學(xué)過程的研究（ Angew. Chem. Int. Ed. ,  2016 ,  55 , 9036）；在單分子水平上揭示了分子馬達(dá)水解的動(dòng)力學(xué)過程（ ACS Nano , 2018 ,  11 , 12789），展現(xiàn)了單分子器件在單分子生物物理研究方面的可靠性。

本發(fā)明公開了一種大分子鏈模板法制備聚丙烯酸類復(fù)合高分子水凝膠的方法，以具有配位功能的大分子鏈為模板，在金屬離子的配位作用下引導(dǎo)丙烯酸單體配位、聚合，制備出具有高機(jī)械強(qiáng)度和自修復(fù)性能的高分子水凝膠。以質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)，該自修復(fù)水凝膠原料組分組成包括大分子模板２．５～１０份，單體５～２５份，水３０～６０份，金屬離子０．１～２．５份，引發(fā)劑０．１～２．５份。其特征是大分子模板的存在有效引導(dǎo)規(guī)整聚合物的制備，同時(shí)增加了水凝膠的機(jī)械強(qiáng)度和自修復(fù)能力。本發(fā)明所制備的復(fù)合水凝膠具有良好的力學(xué)性能及常溫下優(yōu)異的自修復(fù)性能

本發(fā)明公開了一種蝶蛹金小蜂毒液絲氨酸蛋白酶抑制劑Pp-PI多肽，其具有SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列。本發(fā)明還同時(shí)公開了編碼上述蝶蛹金小蜂毒液絲氨酸蛋白酶抑制劑Pp-PI多肽的基因，其具有SEQ ID NO：1中第126-290位的核苷酸序列；或者與SEQ IDNO：1中從核苷酸第126-290位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者其核苷酸序列能在40-55℃條件下與SEQ ID NO：1中從核苷酸第126-290位的核苷酸序列雜交。上述蝶蛹金小蜂毒液絲氨酸蛋白酶抑制劑Pp-PI多肽能用于制備蝶蛹金小蜂毒液絲氨酸蛋白酶抑制劑，用于轉(zhuǎn)基因作物或改造植物共生菌。

利用微層共擠出技術(shù)制備導(dǎo)電層和絕緣層交替排列的層狀材料，該材料具有以下特點(diǎn)： 層數(shù)可以調(diào)，最多可達(dá)到2000多層； 導(dǎo)電層和絕緣層的厚度比可調(diào)； 由于導(dǎo)電層和絕緣層的電阻率差異較大，因此電磁波會(huì)在層狀界面間發(fā)生多次內(nèi)部反射，起電磁屏蔽作用，并且電磁屏蔽性能與層數(shù)和層厚比有關(guān)； 導(dǎo)電物質(zhì)僅分布在導(dǎo)電層中，絕緣層和導(dǎo)電層形成特殊的雙層狀連續(xù)結(jié)構(gòu)，滿足雙逾滲條件，這將導(dǎo)致逾滲閾值降低，電阻率下降； 層狀結(jié)構(gòu)的協(xié)同作用導(dǎo)致材料的力學(xué)性能優(yōu)異； 材料具有各向異性，在厚度方向上不導(dǎo)電。 主要技術(shù)指標(biāo)： 與傳統(tǒng)方法相比，相同導(dǎo)電物質(zhì)含量的層狀復(fù)合材料的電阻率降低50％以上、電磁屏蔽效能(SE)提高50％以上，斷裂伸長(zhǎng)率提高100％以上。 應(yīng)用范圍： 可用于電視機(jī)的屏蔽后蓋、屏蔽罩、屏蔽箱體、電磁屏蔽膜、電磁屏蔽墻布的生產(chǎn)

液態(tài)金屬是一類低熔點(diǎn)的金屬單質(zhì)或者合金，能夠在室溫下形成液態(tài)共晶。考慮到液態(tài)金屬兼具流體和金屬導(dǎo)體的性質(zhì)，液態(tài)金屬可用作功能性流動(dòng)填料，以實(shí)現(xiàn)高分子功能材料的柔性和高導(dǎo)電性并存，使得此類材料可作為潛在的電子柔性器件。之前有論文報(bào)道通過光刻等方法預(yù)先制備微通道，之后往微通道中注入液態(tài)金屬來制得電阻和電容傳感器。然而這種方法成本很大，而且僅基于微孔道的形變，限制了材料的力學(xué)性質(zhì)和電學(xué)感應(yīng)能力?？蒲袌F(tuán)隊(duì)通過將液態(tài)金屬作為流動(dòng)導(dǎo)電填料并利用其對(duì)自由基的催化功能，成功在20秒內(nèi)制得液態(tài)金屬水凝膠功能材料。不同于以前的微通道(Microchannels)模式的液態(tài)金屬傳感器，因液態(tài)金屬表面氧化層和單體極性基團(tuán)之間的錨定作用，實(shí)現(xiàn)了液態(tài)金屬在體系中的均勻分散，同時(shí)發(fā)現(xiàn)了液態(tài)金屬與過氧化物引發(fā)劑發(fā)生反應(yīng)而顯示出的催化活性。因液態(tài)金屬的流體性質(zhì)和高導(dǎo)電性，液態(tài)金屬賦予材料以超長(zhǎng)的拉伸性能（斷裂伸長(zhǎng)率=1500[[%]]），良好的力學(xué)和電學(xué)穩(wěn)定性。此外由于液態(tài)金屬在材料內(nèi)部的不對(duì)稱形變，材料能夠辨別物體在其表面的運(yùn)動(dòng)方向，可識(shí)別個(gè)人的電子簽名和作為潛在的電子皮膚。