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HLA-B27基因具有多態(tài)性，是由多種亞型構(gòu)成的一組基因的總稱，各亞型核苷酸序列存在著個(gè)別位點(diǎn)上的差異。從1973年首次報(bào)道HLA-B27與AS的關(guān)聯(lián)以來，目前已確信B27在SpA的發(fā)病中起重要作用。     大量的臨床研究證實(shí)SpA患者HLA-B27陽性率明顯增高，但各疾病的HLA-B27攜帶率并不完全相同，約90%－95%以上的AS患者HLA-B27陽性，60%－80%的反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎（ReA），80%幼年脊柱關(guān)節(jié)炎(JSpA)，50%伴脊柱關(guān)節(jié)受累的銀屑病或腸病相關(guān)的關(guān)節(jié)炎患者為HLA-B27陽性。HLA-B27陽性的個(gè)體患SpA的危險(xiǎn)性較陰性者大100倍。     在中國(guó)漢族人群中，HLA-B*2705與HLA-B*2704構(gòu)成了HLA-B*27的優(yōu)勢(shì)亞型,其余還存在B*2707,2702,2706，2715，2711，2722，2708等。研究發(fā)現(xiàn)B2704、B2705、B*2702與AS有高度的相關(guān)性，而B*2706、B*2709被認(rèn)為與AS相關(guān)性差或具有保護(hù)作用。     SpA這類疾病起病大多緩慢而隱匿，當(dāng)影像學(xué)檢查出現(xiàn)痕跡確診時(shí)，患者病情已經(jīng)發(fā)展到疾病晚期階段，致殘率高生活質(zhì)量低下，因此臨床檢測(cè)HLA-B27基因來診斷疑似患者。     HLA-B27基因分型測(cè)定試劑盒采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-序列特異性引物法（sequencespecificprimer，PCR-SSP）定性檢測(cè)全血樣本中人類白細(xì)胞抗原HLA-B*2704、HLA-B*2705/07等位基因，可對(duì)SpA的診療提供參考。

產(chǎn)品詳細(xì)介紹    

常見的納米酶大多數(shù)是金屬化合物納米顆粒，其催化活性主要是來自在納米顆粒表面的金屬離子。在自然界中，生物酶的特征表明活性位點(diǎn)和支持、穩(wěn)定活性位點(diǎn)的網(wǎng)絡(luò)環(huán)境對(duì)于高催化效率同樣重要。通過調(diào)整活性位點(diǎn)的成分和環(huán)境可以實(shí)現(xiàn)高的活性和選擇性。水凝膠是一類具有良好生物相容性的三維親水網(wǎng)絡(luò)材料，其結(jié)構(gòu)可以有效地保護(hù)酶分子活性中心，同時(shí)提供更好的底物遷移微環(huán)境，從而實(shí)現(xiàn)有效的催化作用，載酶水凝膠材料已成為生物學(xué)研究中的熱點(diǎn)。納米凝膠為水凝膠的納米粒子，具有類似于宏觀水凝膠材料的親水網(wǎng)絡(luò)及類似流體的傳輸特性，其納米的尺寸可以作為進(jìn)一步體內(nèi)生物應(yīng)用的理想載體。在受限的納米空間中實(shí)現(xiàn)修飾或組裝以獲得雜化納米凝膠仍然存在挑戰(zhàn)。應(yīng)對(duì)這一挑戰(zhàn)，同濟(jì)大學(xué)化學(xué)科學(xué)與工程學(xué)院王啟剛團(tuán)隊(duì)從仿生的角度出發(fā)，設(shè)計(jì)了一種酶催化的原子轉(zhuǎn)移自由基聚合（ATRPase）和金屬配位交聯(lián)方法成功制備出納米人工多酶凝膠體系。該體系具有模擬超氧化物歧化酶（SOD-like）和過氧化物酶（POD-like）特性，可以實(shí)現(xiàn)腫瘤微環(huán)境級(jí)聯(lián)催化的響應(yīng)成像。日前，相關(guān)研究成果以“Multienzyme‐Mimic Nanogels Synthesized by Biocatalytic ATRP and Metal Coordination for Bioresponsive Fluorescence Imaging”為題，發(fā)表在國(guó)際著名學(xué)術(shù)期刊 Angewandte Chemie International Edition （《德國(guó)應(yīng)用化學(xué)》） 上。同濟(jì)大學(xué)化學(xué)科學(xué)與工程學(xué)院為該文的唯一通訊作者單位，碩士生齊美園為第一作者，王霞副教授和王啟剛教授為共同通訊作者。 圖1.（a）人工多酶凝膠體系的ATRPase及配位交聯(lián)制備流程（b）模擬SOD和POD級(jí)聯(lián)酶催化的腫瘤微環(huán)境響應(yīng)的熒光成像機(jī)制。研究人員首先在納米粒子表面修飾酶催化的原子轉(zhuǎn)移自由基聚合的引發(fā)劑(-Br)，以具有良好生物相容性的生物酶為催化劑，修飾有雙鍵的賴氨酸（N-acryloyl-L-lysine）為聚合單體，在納米粒子周圍聚合制備得到聚賴氨酸高分子刷，最后通過亞鐵配位交聯(lián)，從而構(gòu)建出具有多酶活性的人工多酶凝膠體系（如圖1所示）。凝膠體系中高分散的Fe離子一方面作為凝膠網(wǎng)絡(luò)的交聯(lián)劑，同時(shí)作為模擬酶的活性中心。通過模擬SOD和POD酶，先將腫瘤部位高水平的O 2 ?? 催化轉(zhuǎn)化為H 2 O 2 ，進(jìn)一步基于腫瘤部位提升的H 2 O 2 通過級(jí)聯(lián)酶催化反應(yīng)實(shí)現(xiàn)腫瘤微環(huán)境響應(yīng)的安全、高效的腫瘤成像。該人工多酶凝膠體系類似自然的過氧化物酶催化機(jī)制不產(chǎn)生羥基自由基，具有低毒性和高生物安全性。同時(shí)，ATRPase方法和金屬配位交聯(lián)技術(shù)可進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)多種納米材料體系的制備，用于藥物輸送和其他生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用。該研究成果得到了國(guó)家自然科學(xué)基金、國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃等經(jīng)費(fèi)支持以及中國(guó)科學(xué)院強(qiáng)磁場(chǎng)科學(xué)中心的技術(shù)支持。王啟剛教授團(tuán)隊(duì)多年來一直致力于高分子凝膠固定酶技術(shù)及其生物診療應(yīng)用，近5年累計(jì)以通訊作者在 Adv.Mater. ,  Nat. Commun. ,  Angew. Chem. Inter. Ed. 等期刊發(fā)表SCI論文50多篇。文獻(xiàn)鏈接：https://www.onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1002/anie.202002331  PDF：anie_202002331.pdf課題組網(wǎng)站：https://qgwang.tongji.edu.cn/

磷脂酶 D 是一種用于磷脂改性的工業(yè)化生產(chǎn)用酶，近年來研究較多且效果比較明顯的是通過微生物發(fā)酵的方法獲得磷脂酶 D。磷脂酶 D 主要用于兩個(gè)方面：一是從卵磷脂出發(fā)，通過磷酸基轉(zhuǎn)移反應(yīng)，制備含量較少的磷脂化合物，如磷脂酰絲氨酸（PS）、磷脂酰肌醇（PI）等；二是通過轉(zhuǎn)移反應(yīng)合成新的磷脂衍生物，用在藥物學(xué)領(lǐng)域。磷脂酰絲氨酸是磷脂中的一種，天然含量稀少，但它是大腦中主要的酸性磷脂，能控制和調(diào)節(jié)細(xì)胞膜關(guān)鍵蛋白的功能狀態(tài)，提高腦細(xì)胞的活力，改善大腦功能、修復(fù)大腦損傷，成為“腦專一性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)”。本項(xiàng)目通過菌種篩選獲得一株高產(chǎn)磷脂酶 D 的肉桂鏈霉菌菌株。通過發(fā)酵優(yōu)化，發(fā)酵酶活可達(dá)到 10U/mL 以上，可用于 PS、PI 的生產(chǎn)。 

傳統(tǒng)的抗腫瘤藥物，如烷化劑、鉑類試劑、作用于核酸合成的藥物、作用于微管蛋白合成 的藥物等，一般存在毒性較大、選擇性較低等問題，因此，研究尋找安全有效、選擇性較好的 靶向性抗腫瘤藥物具有重大的科學(xué)意義和巨大的社會(huì)價(jià)值。 組蛋白去乙酰化酶 (Histone Deacetylase，HDAC) 是治療腫瘤的新靶標(biāo)，其抑制劑 Vorinostat (SAHA) 和Romidepsin (FK228) 已分別于2006年和2009年經(jīng)美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市用于治 療表皮T細(xì)胞淋巴瘤；該類抑制劑顯示出良好的腫瘤治療效果及較小的毒副作用，是目前最具 前景的抗腫瘤藥物之一。 本項(xiàng)目綜合運(yùn)用分子動(dòng)力學(xué)模擬、計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)、化學(xué)合成、藥理學(xué)活性測(cè)試等 方法，通過“設(shè)計(jì)－合成/修飾－測(cè)試”的多次循環(huán)，開發(fā)了一系列結(jié)構(gòu)新穎的四氫-γ-咔啉骨 架的HDAC抑制劑。該類抑制劑可以有效抑制HDAC總酶及HDAC1的活性，多個(gè)化合物的酶 活性都低于50 nM；并且，該系列多數(shù)化合物對(duì)Hela、A549、HCT116、K562、MCF-7等腫瘤細(xì) 胞株表現(xiàn)出比陽性對(duì)照藥物SAHA更高的活性，多個(gè)化合物對(duì)所測(cè)腫瘤細(xì)胞株的抑制活性低于 1 μM，而對(duì)于人類正常細(xì)胞無抑制活性；在動(dòng)物模型試驗(yàn)中，代表性化合物對(duì)接種Lewis肺癌 荷瘤小鼠模型表現(xiàn)出良好的治療效果，且沒有觀察到明顯的體重變化和毒性反應(yīng)。因此，該類 HDAC抑制劑可以作為藥物先導(dǎo)化合物用于制備抗腫瘤藥物，為廣大腫瘤病患者帶來福音，也 向開發(fā)我國(guó)具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的抗腫瘤藥物邁進(jìn)一步。 

酶解林蛙油及軟膠囊的制作方法,它涉及林蛙油的酶水解及軟膠囊的制作工藝.本發(fā)明將打勻后的林蛙油和水按(1:35)～(1:45)的重量比例制成水混懸液,在水混懸液中加入木瓜蛋白酶,在加入木瓜蛋白酶的林蛙油酶水解液中再加入胃蛋白酶.將酶解,冷凍干燥后的經(jīng)超微粉碎的林蛙油和加入了大豆磷脂的玉米油按1:1的重量比例,經(jīng)膠體磨研勻,再經(jīng)軟膠囊機(jī)壓制成膠囊即得.本發(fā)明采用酶解蛋白質(zhì)的方法,提高了蛋白質(zhì)的吸收率,保持和改進(jìn)了林蛙油的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu),改善了其溶解性.使林蛙油軟膠囊的制備工藝更加合理,外觀更加美觀.酶解法與其它水解法相比較,屬溫和水解,只作用于蛋白質(zhì),使其水解成氨基酸或多肽,對(duì)林蛙油的其它成分沒有影響.

其他成果/n一種酶法制備有機(jī)菜籽多肽的方法，包括：菜籽蛋白的制備；將菜籽蛋白與蒸餾水按一定料液比混勻，并進(jìn)行超聲輔助濕熱處理，得到濕熱菜籽蛋白漿液；向濕熱菜籽蛋白漿液中加入三聚磷酸鈉進(jìn)行超聲輔助磷酸化處理，得到磷酸化菜籽蛋白漿液；調(diào)節(jié)磷酸化菜籽蛋白漿液的pH和溫度，并加入堿性蛋白酶進(jìn)行超聲輔助酶解，得到一次酶解液；調(diào)節(jié)一次酶解液的pH和溫度，并加入復(fù)合風(fēng)味蛋白酶進(jìn)行超聲輔助酶解，得到二次酶解液；對(duì)二次酶解液進(jìn)行微波滅酶處理，得到滅酶酶解液，將滅酶酶解液離心得到菜籽多肽清液，再進(jìn)行冷凍干燥處理，即得成品的有機(jī)菜籽多肽。該酶法制備有機(jī)菜籽多肽的方法，工藝安全、制備便捷。

該技術(shù)是利用鵝源草酸青霉果膠酶生產(chǎn)磁性固定化鵝源草酸青霉果膠酶， 技術(shù)適用于食品、醫(yī)藥、畜禽飼料生產(chǎn)企業(yè)。 技術(shù)利用混合共沉淀法制備果膠酶納米級(jí)磁性高分子微球載體，利用超聲 波技術(shù)彌補(bǔ)共沉淀法中粒徑不均勻的不足，有效控制粒徑的大小，提高了微粒青島農(nóng)業(yè)大學(xué)科技成果介紹 2017 －42－ 作為載體的靶向性；采用真空冷凍干燥技術(shù)處理固定化鵝源草酸青霉果膠酶， 減少了采用鼓風(fēng)加熱干燥常規(guī)法造成載體中羥基、羧基官能團(tuán)的活性損失，使 制備的載體中有效官能團(tuán)回收率更高。另外，以磁性 Fe3O4 為磁核，殼聚糖-阿 拉伯膠為磁殼制備磁性雙酶(果膠酶+纖維素酶)復(fù)合微球，使磁性雙載體雙酶固 定化產(chǎn)品的連續(xù)重復(fù)利用效果更好，具有良好的熱穩(wěn)定性。研發(fā)的磁性高分子 微球粒徑為 10～80.45nm，具有良好的磁響應(yīng)性，能夠?qū)崿F(xiàn)均勻酶解、重復(fù)利用。

篩 選 得 到 一 株 具 有 良 好 過 氧 化 氫 酶 生 產(chǎn) 性 能 的 菌 株 嗜 熱 子 囊 菌 Thermoascus aurantiacus WSH03-01,經(jīng)優(yōu)化搖瓶發(fā)酵產(chǎn)酶水平達(dá)到優(yōu)化前的 10 倍。確定了添加乙醇優(yōu)化過氧化氫酶的發(fā)酵工藝并放大。最終在 1500L 罐中發(fā)酵120 小時(shí)，產(chǎn)酶達(dá)到 3650U/mL。T. aurantiacus WSH03-01 所產(chǎn)過氧化氫酶的熱穩(wěn)定性較好。最適在工業(yè)化應(yīng)用試驗(yàn)中，利用過氧化氫酶處理漂白棉織物后的殘余過氧化氫，處理效果達(dá)到了傳統(tǒng)高溫大量漂洗的前處理水平，處理過程中節(jié)水近 1/2,節(jié)能 1/3，廢水排放量減少 50%左右，減輕了污水處理的負(fù)擔(dān)。在 1500L罐中發(fā)酵 120 小時(shí)，產(chǎn)酶達(dá)到 3650U/mL。 

成果簡(jiǎn)介： 為解決葡萄糖酸及其復(fù)合鹽生產(chǎn)過程中的酸堿污染及催化劑成本高的難題，引入固定化葡萄糖氧化酶和過氧化氫酶一步催化技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了產(chǎn)物的連續(xù)化生產(chǎn)，綠色環(huán)保并大幅度降低了成本。在此過程中，調(diào)控了固定化介質(zhì)的表面性質(zhì)，提高了固定化酶的活性和穩(wěn)定性；改變了固定化酶的pH耐受性，可在不加酸堿中和低pH下催化反應(yīng)，大幅度降低了廢水處理的難度。