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終末分化的體細(xì)胞可以通過SCNT或者誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞（iPS）技術(shù)，重編程至全/多能性的狀態(tài)。與SCNT和iPS技術(shù)相比，化學(xué)小分子誘導(dǎo)（CiPS）僅使用化學(xué)小分子就能使普通體細(xì)胞發(fā)生重編程，逆轉(zhuǎn)為多潛能干細(xì)胞。CiPS技術(shù)不僅簡(jiǎn)單，而且不受試驗(yàn)材料限制及不涉及倫理方面的問題，因此CiPS具有更廣泛的科研、臨床及育種應(yīng)用價(jià)值。然而，CiPS的誘導(dǎo)耗時(shí)長(zhǎng)且效率低，如何提高CiPS的誘導(dǎo)效率，是化學(xué)誘導(dǎo)細(xì)胞重編程領(lǐng)域亟待解決的問題之一。 本研究針對(duì)哺乳動(dòng)物SCNT和CiPS介導(dǎo)的體細(xì)胞重編程效率低與克隆動(dòng)物出生率低等關(guān)鍵科學(xué)問題，利用課題組在2018年自主研發(fā)的“胚胎ZGA實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)”，結(jié)合siRNA-repressor和mRNA-inducer技術(shù)，對(duì)16種“合子基因組調(diào)控因子（ZGA-regulator）”進(jìn)行篩選。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Dux、Dppa2和Dppa4在體細(xì)胞重編程的早期階段發(fā)揮關(guān)鍵作用。如用CRISPR-Cas9敲除Dux，克隆胚胎將完全被阻斷在2-細(xì)胞時(shí)期。只有在瞬間過表達(dá)Dux（tOE-Dux），使其符合內(nèi)源Dux時(shí)空特性時(shí)，才能提高核移植重編程效率，我們將這種方法稱為D-SCNT。此外，D-SCNT結(jié)合干擾DNA甲基化酶（si-Dnmts）能夠進(jìn)一步提高克隆動(dòng)物的出生率。研究還發(fā)現(xiàn)，特異性過表達(dá)Dux可以顯著提高CiPS的細(xì)胞重編程效率和提高干細(xì)胞的多能性，并對(duì)相關(guān)機(jī)制做了闡釋。 該研究首次揭示了ZGA調(diào)控因子Dux在體細(xì)胞重編程中的作用機(jī)制，時(shí)空特異性過表達(dá)Dux可大幅度提高克隆效率和化學(xué)小分子誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的建系效率，為干細(xì)胞的再生醫(yī)學(xué)與生物工程應(yīng)用提供了新的途徑。

國(guó)際頂級(jí)綜合期刊美國(guó)科學(xué)院院刊（PNAS）在線發(fā)表動(dòng)物醫(yī)學(xué)院孔慶科博士課題組在多糖疫苗研究中的重要研究成果“Synthesis and delivery of Streptococcus pneumoniae capsular polysaccharides by recombinant attenuated Salmonella vaccines”（減毒沙門氏菌疫苗合成及遞送來(lái)源于肺炎鏈球菌的多糖抗原）。該研究首次通過合成生物學(xué)，細(xì)菌遺傳學(xué)及免疫學(xué)等方法，將革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的表面多糖抗原成功表達(dá)合成于革蘭氏陰性細(xì)菌減毒沙門氏菌的表面，并連接于沙門氏菌內(nèi)毒素的類脂A上，利用遺傳改造及調(diào)控的減毒沙門菌疫苗載體遞送肺炎鏈球菌的多糖抗原開發(fā)新型疫苗。該方法突破了目前固有的陽(yáng)性細(xì)菌多糖疫苗的構(gòu)建方式，為將來(lái)快速、高效的構(gòu)建多糖疫苗奠定了基礎(chǔ)。 博士后蘇華荔及青年教師劉青博士為共同第一作者，動(dòng)物醫(yī)學(xué)院孔慶科博士為通訊作者，西南大學(xué)為第一完成單位及第一通訊作者單位。美國(guó)科學(xué)院院士、佛羅里達(dá)大學(xué)Curtiss教授為共同通訊作者，動(dòng)物醫(yī)學(xué)院2017級(jí)碩士研究生卞曉萍及佛羅里達(dá)大學(xué)王世峰博士參與相關(guān)工作。該研究得到國(guó)家自然科學(xué)基金及美國(guó)NIH項(xiàng)目的資助。

本發(fā)明涉及分子細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域中，一種多能干細(xì)胞形成必需蛋白CREPT的在誘導(dǎo)多能干細(xì)胞中的應(yīng)用。本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是如何制備多能干細(xì)胞及不能誘導(dǎo)為多能干細(xì)胞的細(xì)胞模型。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明首先提供了下述X1)或X2)的方法：X1)多能干細(xì)胞的制備方法，包括：增加名稱為動(dòng)物細(xì)胞1的出發(fā)動(dòng)物細(xì)胞中CREPT蛋白質(zhì)的含量和/或活性，得到重組動(dòng)物細(xì)胞，利用所述重組動(dòng)物細(xì)胞制備多能干細(xì)胞；所述動(dòng)物細(xì)胞1非干細(xì)胞；X2)不能誘導(dǎo)為多能干細(xì)胞的細(xì)胞模型的制備方法，包括：降低名稱為動(dòng)物細(xì)胞2的出發(fā)動(dòng)物細(xì)胞中所述CREPT蛋白質(zhì)的含量和/或活性，得到不能誘導(dǎo)為多能干細(xì)胞的細(xì)胞模型；所述動(dòng)物細(xì)胞2非干細(xì)胞且表達(dá)所述CREPT蛋白質(zhì)。所述動(dòng)物細(xì)胞1和所述動(dòng)物細(xì)胞2均為離體的動(dòng)物細(xì)胞。利用所述重組動(dòng)物細(xì)胞制備多能干細(xì)胞可利用Yamanaka因子進(jìn)行。Yamanaka因子為Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc。

本發(fā)明涉及一種綠盲蝽唾液酶中果膠酶與淀粉酶的體外提取測(cè)定方法，利用Paraflim膜，采取膜夾營(yíng)養(yǎng)法提取綠盲蝽唾液酶，并測(cè)定綠盲蝽中果膠酶、淀粉酶活性，Paraflim膜法提取綠盲蝽唾液酶利用Paraflim膜、膠卷盒、紗布、橡皮筋、位于兩層Paraflim膜間的液體營(yíng)養(yǎng)介質(zhì)，利用酶與底物反應(yīng)的原理，測(cè)定綠盲蝽唾液中果膠酶、淀粉酶活性。本方法材料易得，操作簡(jiǎn)單方便，制作成本低，占空間小，可實(shí)現(xiàn)綠盲蝽唾液酶的大量、批量提取，并且綠盲蝽可繼續(xù)回收利用。

不孕不育嚴(yán)重影響人類的衛(wèi)生健康，而DAZ家族蛋白的缺失是導(dǎo)致男性不育最常見的分子缺陷之一，約占非梗阻性無(wú)精癥男性不育患者的10—15%。但是，對(duì)于DAZ家族蛋白缺失導(dǎo)致不育的機(jī)理尚不清楚。  徐宇君課題組對(duì)男性不育因子DAZ家族的DAZL蛋白在精子發(fā)生發(fā)育中的調(diào)控作用進(jìn)行全面的遺傳學(xué)、發(fā)育學(xué)、分子生物學(xué)水平機(jī)制剖析。研究發(fā)現(xiàn)DAZL蛋白直接結(jié)合3000多個(gè)睪丸中的轉(zhuǎn)錄本，其中包括了控制多個(gè)精子發(fā)生關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)。直接通過參與這些精子發(fā)生必需蛋白質(zhì)翻譯調(diào)控，促進(jìn)這些下游靶標(biāo)轉(zhuǎn)錄本翻譯成蛋白。DAZL敲掉后其靶標(biāo)基因的表達(dá)在蛋白水平全部顯著下降，精子的發(fā)育各階段所需的特殊蛋白無(wú)法得到滿足，精子發(fā)生的重要事件被迫停滯，從而影響精子的發(fā)育和雄性生殖。這些發(fā)現(xiàn)對(duì)于DAZ家族導(dǎo)致男性不育的致病機(jī)理提供了新的認(rèn)識(shí)。

選自美國(guó)引進(jìn)的花穗種子，植株高大，直立，中大莖，節(jié)間園筒形，露光部分黃綠色，芽園形，較易脫葉，57號(hào)毛群極少，葉片濃綠，萌芽快而整齊，出苗率高，分蘗較早，分蘗力強(qiáng)，主莖和分蘗差異小，蔗莖均勻。前中期生長(zhǎng)快、中后期生長(zhǎng)穩(wěn)健，有效莖數(shù)較多，宿根發(fā)株率高，宿根性能好。高抗黑穗?。恢锌够ㄈ~病。

本發(fā)明提供了棘孢木霉TD3104及其在制備抑制植物病原菌的菌劑中的應(yīng)用。所述棘孢木霉菌TD3104的保藏編號(hào)是CGMCC 13161。本發(fā)明提供了所述棘孢木霉菌在防治煙草、蘋果植物病原菌中的應(yīng)用。本發(fā)明提供的拮抗菌能有效抑制煙草黑脛病菌、煙草青枯病菌、立枯絲核菌、煙草根腐病病原菌鐮刀菌、煙草赤星病和蘋果腐爛病、蘋果輪紋病的病原菌生長(zhǎng)，可以有效防治相關(guān)病害，并且可以減少化學(xué)農(nóng)藥的用量及其土

本發(fā)明涉及一株惡臭假單胞菌RXX?01，分類名為Pseudomonas putida，已保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(CGMCC)，地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，保藏日期為2016年11月1日，保藏編號(hào)為CGMCC No.13224。本發(fā)明提供的惡臭假單胞菌RXX?01對(duì)土壤DBP和DEHP復(fù)合污染具有高效的降解效果，在鄰苯二甲酸酯污染土壤修復(fù)領(lǐng)域具

研發(fā)階段/n本成果在國(guó)內(nèi)首次建立了能同時(shí)檢測(cè)動(dòng)物尿中青霉素類、頭孢菌素類、氨基苷類、四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類、磺胺類和林可霉素等抗菌藥物殘留的微生物學(xué)快速篩選方法。本法對(duì)各類藥物的檢測(cè)限均低于或等于國(guó)家規(guī)定的最高殘留限量標(biāo)準(zhǔn)。通過系列工藝研究及放大試驗(yàn)、穩(wěn)定性考察、動(dòng)物給藥及殘留實(shí)樣考核等研究，研制的試劑盒假陰性率為0，假陽(yáng)性率為7%以下，保質(zhì)期不低于6個(gè)月，與國(guó)外同類產(chǎn)品相比，該試劑盒的靈敏度、假陽(yáng)性率、假陰性率和重現(xiàn)性等更好。技術(shù)水平：鑒定成果（成果鑒定號(hào)：農(nóng)科果鑒字（2008）第52號(hào)，該成果總體