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蘭州大學(xué)
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蘭州大學(xué)青年研究員朱國梁在《Nature Communications》發(fā)表了非洲豬瘟病毒轉(zhuǎn)錄調(diào)控的分子機制

2025-02-12 16:38:47
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近日,蘭州大學(xué)動物醫(yī)學(xué)與生物安全學(xué)院/中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所聯(lián)合中國科學(xué)院生物物理研究所在《Nature Communications》期刊發(fā)表題為“Structural basis of RNA polymerase complexes in African swine fever virus”的研究論文,揭示了非洲豬瘟病毒(ASFV)RNA聚合酶(RNAP)復(fù)合體及其與轉(zhuǎn)錄泡結(jié)合的三維結(jié)構(gòu),為理解ASFV的轉(zhuǎn)錄周期及疫苗和藥物研發(fā)提供了新思路。

非洲豬瘟是危害世界養(yǎng)豬業(yè)已逾百年的“頭號殺手”,它是由ASFV感染家豬和野豬引起的一種急性烈性傳染病,嚴(yán)重危害世界養(yǎng)豬產(chǎn)業(yè)。ASFV作為核質(zhì)大DNA病毒,類似于牛痘病毒,自身可以編碼與真核生物同源的RNAP核心亞基與轉(zhuǎn)錄因子,而不依賴宿主細胞完成轉(zhuǎn)錄過程。RNAP復(fù)合體作為ASFV生命周期關(guān)鍵的多功能蛋白質(zhì)機器,負責(zé)基因組的轉(zhuǎn)錄和調(diào)控,研究其結(jié)構(gòu)和功能意義重大。然而,由于組成RNAP復(fù)合體的亞基眾多、不同轉(zhuǎn)錄狀態(tài)其組成和構(gòu)象會動態(tài)變化,ASFV轉(zhuǎn)錄調(diào)控的分子機制仍然尚不清楚。

本研究利用親和標(biāo)簽和蔗糖密度梯度離心純化了感染狀態(tài)下的內(nèi)源ASFV RNAP,解析了多種天然構(gòu)象的高分辨率冷凍電鏡結(jié)構(gòu)。此外,利用ASFV早期轉(zhuǎn)錄基因片段模擬轉(zhuǎn)錄泡結(jié)構(gòu),獲得了轉(zhuǎn)錄延伸狀態(tài)下的構(gòu)象。體外功能實驗表明,內(nèi)源ASFV RNAP可以利用轉(zhuǎn)錄泡在體外延伸引物鏈。ASFV RNAP與經(jīng)典RNAP的核心結(jié)構(gòu)相似,但在外表面有一些獨特的區(qū)域,可能介導(dǎo)與特定轉(zhuǎn)錄因子的相互作用。尤其是發(fā)現(xiàn)了一個獨特的亞基M1249L,其結(jié)構(gòu)類似于一個“籠子”,將核心亞基包裹在里面,與核心亞基形成了廣泛的相互作用,穩(wěn)定ASFV RNAP的整體結(jié)構(gòu)。M1249L由多個結(jié)構(gòu)域組成,與核心亞基動態(tài)結(jié)合,形成了多種構(gòu)象,不同構(gòu)象間可能互相轉(zhuǎn)換,代表著不同的轉(zhuǎn)錄狀態(tài)。M1249L C末端結(jié)構(gòu)域深深地插入RNAP內(nèi)部,占據(jù)了核酸結(jié)合位點。與牛痘病毒RNA聚合酶全復(fù)合體的結(jié)構(gòu)分析表明,M1249L的結(jié)合導(dǎo)致多種經(jīng)典轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合受阻。因此,M1249L作為ASFV特有的轉(zhuǎn)錄因子,穩(wěn)定ASFV RNAP的整體結(jié)構(gòu),并通過動態(tài)結(jié)合機制調(diào)控ASFV RNAP的活性。這些研究結(jié)果不僅發(fā)現(xiàn)了天然狀態(tài)下ASFV RNAP獨特的結(jié)構(gòu)特征,還為ASFV防控疫苗和藥物的研發(fā)提供了理論基礎(chǔ)。

近期,來自中國科學(xué)院生物物理研究所王祥喜、饒子和團隊聯(lián)合中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所步志高團隊在《Nature Communications》發(fā)表了相近工作,共同為深入理解非洲豬瘟的致病機制提供了新的視角。

青年研究員朱國梁、博士研究生席飛和碩士研究生曾吳瑕為文章的第一作者,鄭海學(xué)、孫飛、朱紫祥和朱赟研究員為文章的通訊作者。該研究得到了國家重點研發(fā)計劃項目、國家生豬產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項目、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院項目、甘肅省科技計劃項目、廣東省科技計劃項目等資助。

本項研究成果也是蘭州大學(xué)與中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所校所共建,開展學(xué)科交叉,推進平臺型學(xué)院建設(shè)的具體體現(xiàn)。

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