?????????NMT和激光共聚焦技術的比較

（1）什么是激光共聚焦

激光掃描共聚焦熒光顯微鏡（laser?scanning?confocal?microscopy,?LSCM）是一種利用計算機、激光和圖像處理技術獲得生物樣品三維數(shù)據(jù)、目前最先進的分子細胞生物學的分析儀器。???????????????????

主要用于觀察活細胞結構及特定分子、離子的生物學變化，定量分析，以及實時定量測定等。其不僅可以得到非常清晰的熒光圖像，進行多重熒光標記的定位和定量分析，還具有圖像三維重建、熒光共振能量轉移譜測定，甚至膜電位測定等功能，成為生命科學研究的重要技術手段。

（2）激光共聚焦的局限

隨著激光共聚焦技術應用范圍的擴大，其在研究中的局限性也逐漸突顯。

激光共聚焦技術主要采集的是生物樣品內(nèi)部的離子分子信息，這些離子分子信息的改變既可能源于樣品內(nèi)部離子/分子源的變化，也可能源于樣品內(nèi)外的離子/分子交換。這兩種離子/分子變化過程是由完全不同的生命機制引發(fā)的。

這要求研究者必須通過其它實驗結果，才能得出相對準確的結論。若單純用激光共聚焦數(shù)據(jù)作為檢測或診斷標準，往往面臨較大的假陽性風險。

（3）NMT對比激光共聚焦

相同點:?實時
動態(tài)
數(shù)據(jù)可視化
測定游離的離子


區(qū)別:??(1)激光共聚焦技術?
使用染料和激光光源??
需要標記 ???????????????
熒光易發(fā)生淬滅 ???????????????
測量時間短 ???????????????
半活體（有損傷） ???????
檢測內(nèi)部的離子濃度變化 ???????
測定種類較少，依賴于染料???????
測量材料不能太大，以細胞為主???
只能同時測定一種離子 ???????
????????(2)?非損傷微測技術
????????使用電極或者傳感器
????????無需標記
????????電極或者傳感器穩(wěn)定
????????測量時間可短，可長
????????近似活體或者完全活體（測定無損傷）
????????檢測跨膜的離子流速以及外部的離子濃度
????????測定種類多，可測Na+，K+，NO3-，O2等
????????測量材料不限，從細胞到整體都可以測量
????????可以同時測定兩種離子

結合 共同使用，實現(xiàn)內(nèi)外兼測